HIF—1α基因表达沉默对肝癌细胞P13K／AKT信号转导通路影响的研究

目的：探讨沉默缺氧诱导因子-1α（hypoxiainduciblefactor-1α，HIF-1α）基因表达对肝癌细胞P13K／AKT信号转导通路的影响。方法：选用大鼠CBRH-7919肝癌细胞株作为研究对象，利用氯化钻（CoCl2）建立厌氧模型。构建HIF-1α小分子干扰RNA（smallinterferingRNA，siRNA）特异性载体复合物，小分子RNA干扰技术沉默肝癌细胞HIF-1α的基因表达，分别利用RT-PCR和免疫印迹法检测肝癌细胞HIF-1α、血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）、磷酸化AKT（p-AKT）、AKT和P13K在iTIRNA和（或）蛋白水平的表达变化。结果：肝癌细胞在缺氧条件下表达HIF-1α较常氧对照组显著增多，差异具有统计学意义，PmRNA=0．002，P蛋白=0．003。特异性HIF-1αsiRNA表达载体转染肝癌细胞后，肝癌细胞HIF-1α（PmRNA和P蛋白均〈0．001）、VEGF（PmRNA=0．001，P蛋白〈0．001）和p-AKT（P§自〈0．001）的表达明显减少；AKT和P13K的表达显著增多，与对照组的差异均具有统计学意义，P蛋白值分别为0．032和0．020。结论：特异性siRNA干扰沉默HIF-1α基因表达可抑制肝癌细胞P13K／AKT信号转导通路的激活。