血卟啉光动力对人胆管癌细胞转移潜能影响实验研究

目的：探讨血卟啉衍生物介导的光动力疗法（hematoporphyrinderivative，HPD-PDT）对人胆管癌细胞增殖和侵袭的影响。方法：体外培养人胆管癌细胞系QBC939，经系列浓度的HPD处理，并应用半导体激光治疗仪给予不同强度的光照，CCK-8试剂盒检测HPI〉PDT对人胆管癌细胞增殖的影响；Transwell小室（Matrigel侵袭实验）检测HPD-PDT对人胆管癌细胞体外侵袭能力的影响；酶联免疫吸附试验（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）检测细胞培养上清液中分泌的VEGF-C浓度变化；RT-PCR检测细胞中VEGF_CmRNA的表达变化；SP免疫组化染色观察细胞中VEGF-C蛋白的表达变化。结果：CCK-8检测结果显示，HPD-PDT在体外能够抑制QBC939细胞生长，当HPD质量浓度4μg／mL和光照剂量5J／cm2时，实验组A450值为1．54l7±0．0983，明显低于空白对照组的2．0278±0．1986，P〈0．01；细胞生长抑制率达到23．97％，且随着激光能量密度及光敏剂浓度的增加，其抑制作用也越明显。体外侵袭实验结果显示，实验组穿过Matrigel胶的细胞数为13．33±1．155，明显少于空白对照组的31．67±2．517，P〈O，01；ELlSA结果显示，实验组上清液中分泌的VEGF-c浓度为（1558．24l7±97．）143）ng／L，低于空白对照组的（1716．3750±45．0472）ng／L，P〈0．05；RT—PCR结果显示，实验组VEGF_CmRNA／hGAPDH的比值为0．7009±0．1872，明显低于空白对照组的1．5425±0．1078，P〈0．01；SP免疫组化染色结果显示，实验组VEGF—C蛋白表达阳性的细胞百分率为24．52％±2．22％，明显低于空白对照组的56．94％±3．38％，P〈0．01。结论：HPD-PDT能够抑制人胆管癌细胞QBC939的增殖活性及体外侵袭能力，并有可能通过下调VEGF-C因子的表达进一步抑制胆管癌的生长和转移。

Inbibitional effects of photodynamic therapy of hematoporphyrin derivative on proliferation and invasion of human cholangiocarcinoma cells