| 摘 要： | 目的 N-酰基乙醇胺酸性水解酶(NAAA)是一种半胱氨酸水解酶酶,其主要分布于免疫细胞的溶酶体中,可特异性地降解棕榈酰乙醇胺(PEA)。棕榈酰乙醇胺(PEA)是一种过氧化物酶体增殖剂激活受体α(PPAR-α)的内源性配体,具有抗炎镇痛的内源性脂质。在疾病条件下,PEA的合成代谢发生紊乱,组织中PEA含量下降,促进了炎症的发生及疾病的恶化。抑制NAAA的活性,可有效提高PEA含量,达到治疗炎症和疾病的目的。脑皮质挫伤(TBI)是一种常见的脑损伤,脑组织在外力作用后形成出血和挫碎,继而引起脑水肿,出血,意识障碍等症状,其中血脑屏障的破坏是发生此类次级损伤的重要因素。方法采用Feeney′s自由落体模型在C57BL/6J小鼠上进行造模。在造模之后的24 h内给予NAAA抑制剂F96(10,30 mg·kg~(-1),8 h),或采用Crispr-Cas9技术敲除小鼠的naaa基因,应用免疫荧光,Western印迹LC-MS等技术,考察NAAA对血脑屏障完整性以及脑外伤组织损伤程度的影响。结果在正常小鼠的脑组织中,NAAA主要分布于神经元细胞,并以无活性的完整形式存在;在小鼠遭遇脑外伤时,一方面,脑组织固有的NAAA发生自水解,形成活性形态,促进PEA降解;另一方面,外周的免疫细胞,如中性粒细胞进入脑组织,其携带的NAAA进一步促进了脑中PEA的降解。随着PEA的降解,脑微血管中Claudin-5,ZO-1,Occludin等血脑屏障(BBB)相关蛋白发生降解,导致BBB通透性增强,进一步促进了脑水肿和出血。而给予NAAA抑制剂F215,或者敲除NAAA的基因,都可以有效地保护BBB,减轻组织伤害。结论NAAA可以作为治疗BBB损伤等相关疾病的新靶标。
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