| 摘 要： | 目的研究连接蛋白32及细胞缝隙连接对卵巢癌细胞顺铂耐药性的影响。方法以A2780为亲代细胞,采用药物浓度递增法构建对顺铂耐药的卵巢癌细胞系(A2780-CDDP),CCK8法测定顺铂对肿瘤细胞的IC50,计算耐药指数(resistance index,RI)。"细胞接种荧光示踪法"检测卵巢癌细胞耐药行程过程中细胞的缝隙连接功能及Cx32的表达情况;调节A2780-CDDP细胞Cx32的表达,观察耐药性的变化;提细胞膜及胞浆蛋白,用Western印迹分别检测Cx32在A2780和A2780-CDDP的表达分布情况。结果本研究建立了顺铂耐药人卵巢癌细胞株A2780-CDDP,亲代细胞IC50为4.7 mg·L~(-1),A2780-CDDP的IC50为33.8 mg·L~(-1),耐药指数为7.2。同时,随着耐药性的增强,Cx32表达量逐渐增加,增强A2780-CDDP细胞中的GJ功能可提高顺铂的细胞毒性。此外,尽管Cx32在A2780-CDDP细胞中表达增加,但它更多地定位于细胞质而不是细胞膜,并且在A2780-CDDP细胞中下调Cx32的表达可以使其对顺铂治疗敏感。结论 Cx32参与顺铂耐药,Cx32在胞质中的定位对卵巢癌顺铂耐药有重要意义。
|
