| 摘 要： | 目的探究海洋来源新型多硫代二酮哌嗪(ETP)类化合物PEN-A在体内外的抗肿瘤活性并进一步明确PEN-A靶向HSP90的作用特点;比较并阐明3种ETP类化合物PEN-A,PNSA和HDN-1对于HSP90客户蛋白选择性抑制作用的机制。方法 MTT法、细胞划痕实验检测PEN-A对于肿瘤细胞系增殖、迁移的抑制作用;Co-IP检测PEN-A对于HSP90与其客户蛋白结合的影响;荧光偏振、胰酶水解指纹图谱、表面等离子共振(SPR)实验检测PEN-A与HSP90蛋白的结合位点;体内评价PEN-A对于结肠癌移植瘤的抗肿瘤活性。HSP90 ATPase实验、ADH聚合实验检测三种ETP类化合物对于HSP90活性的影响;F5M实验、胰酶水解指纹图谱检测3种化合物与HSP90的结合位点。结果 PEN-A对于多种肿瘤细胞均有增殖抑制作用,且显著抑制HCT-116细胞的增殖、迁移能力;PEN-A靶向结合于HSP90C端从而抑制其与客户蛋白的结合,PEN-A在体内具有靶向抑制HSP90的抗肿瘤活性。3种ETP类化合物PEN-A,PNSA和HDN-1均可抑制HSP90的ATPase活性及C端蛋白的聚合,但由于三者结合位点的不同导致对于HSP90客户蛋白的降解具有选择性。结论研究了PEN-A靶向Hsp90-C端抑制肿瘤的作用特点,为今后将其开发为一种新的靶向Hsp90-C端的抗肿瘤药物奠定基础。明确了三种ETP类化合物由于靶向HSP90-C端的结合位点的不同导致其对于HSP90客户蛋白抑制具有选择性,为今后寻找特异性HSP90抑制剂提供理论依据。
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