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miR-1在心肌细胞生长中的调节作用
引用本文:许旭东,宋晓伟,秦永文.miR-1在心肌细胞生长中的调节作用[J].第二军医大学学报,2010,31(11):1161-1164.
作者姓名:许旭东  宋晓伟  秦永文
作者单位:第二军医大学长海医院心血管内科,上海,200433
基金项目:国家自然科学基金(30828006).
摘    要:摘要] 目的 构建并鉴定microRNA-1(miR-1) 的腺病毒表达载体,并探讨其在心肌肥厚中的介导作用。方法 PCR扩增含大鼠miR-1前体的DNA片段,并将其克隆到腺病毒穿梭质粒pAdTrack。pAdTrack经PmeⅠ酶切线性化后与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1在BJ5183菌中进行同源重组。重组质粒pAd-precusor-miR-1线性化后,转染293A细胞,进行病毒包装,得到重组腺病毒颗粒Ad-miR-1。Ad-miR-1与Ad-GFP病毒转染培养的乳鼠心肌细胞,通过实时荧光定量PCR方法检测miR-1的表达效率,并分析心肌细胞表面积及肥厚标志物ANP(Nppa)、β-MHC(myh7)的基因表达变化。结果 基因测序及酶切鉴定证实重组Ad-precursor-miR-1腺病毒载体构建成功,腺病毒Ad-miR-1转染心肌细胞后,实时荧光定量PCR方法证实腺病毒Ad-miR-1能够显著提高心肌细胞内miR-1的表达水平,减小心肌细胞表面积及Nppa、myh7的表达。结论 利用同源重组方法构建的miR-1腺病毒能够提高心肌细胞内miR-1的表达,抑制心肌细胞生长。

关 键 词:心肌细胞  腺病毒  microRNAs  miR-1
收稿时间:6/1/2010 12:00:00 AM
修稿时间:2010/10/6 0:00:00

Role of miR-1 in regulating cardiomyocyte growth
XU Xu-dong,SONG Xiao-wei and QIN Yong-wen.Role of miR-1 in regulating cardiomyocyte growth[J].Academic Journal of Second Military Medical University,2010,31(11):1161-1164.
Authors:XU Xu-dong  SONG Xiao-wei and QIN Yong-wen
Institution:Department of Cardiology, Changhai Hospital, Second Military Medical University, Shanghai 200433, China and Department of Cardiology, Changhai Hospital, Second Military Medical University, Shanghai 200433, China
Abstract:
Keywords:cardiomyocyte  adenovirus  microRNAs  miR-1
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