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| 微丝相关蛋白hHBRK1突变体的构建、表达及纯化 | |
| 引用本文： | 雷呈祥,隋建丽,白贝,颜贤忠,徐勤枝,周平坤. 微丝相关蛋白hHBRK1突变体的构建、表达及纯化[J]. 军事医学科学院院刊, 2005, 29(6): 528-530,553 |
| 作者姓名： | 雷呈祥 隋建丽 白贝 颜贤忠 徐勤枝 周平坤 |
| 作者单位： | 1. 军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京,100850;海军医学研究所,上海,200433 2. 军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京,100850 3. 军事医学科学院仪器测试分析中心,北京,100850 |
| 基金项目： | 北京市自然科学基金项目（5042023） |
| 摘 要： | 目的：构建微丝相关蛋白hHBRK1截短体和突变体原核表达载体，并表达及纯化融合蛋白。方法：采用常规PCR并结合定点突变技术，对hHBrkl基因进行缺失和点突变；利用限制性内切酶将PCR产物克隆至原核表达载体pGEX-4T；IPTG诱导融合蛋白表达，通过谷胱甘肽一琼脂糖纯化技术分离纯化GST融合蛋白。结果与结论：构建了包括氨基端缺失截短体hHBRK1-AN、羧基端缺失截短体hHBRK1-AC和点突变蛋白hHBRKl-S^56G^57在内的原核表达质粒，分离获得较高纯度的重组hHBRKl突变体融合蛋白，Western杂交证实纯化蛋白为GST融合蛋白。本实验为进一步研究hHBRK1的相互作用蛋白及其可能的结合位点提供了基础。 |
| 关 键 词： | hHBRK1 肌动蛋白类 基因突变 融合蛋白 微丝蛋白质类 聚合酶链反应 |
| 文章编号： | 1000-5501（2005）06-0528-04 |
| 收稿时间： | 2005-06-18 |
| 修稿时间： | 2005-06-18 |
Construction, expression and purification of F-actin related protein hHBRK1 mutants |
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| LEI Cheng-Xiang,SUI Jian-Li,BAI Bei,YAN Xiang-Zhong,XU Qin-Zhi,ZHOU Ping-Kun. Construction, expression and purification of F-actin related protein hHBRK1 mutants[J]. Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences, 2005, 29(6): 528-530,553 | |
| Authors: | LEI Cheng-Xiang SUI Jian-Li BAI Bei YAN Xiang-Zhong XU Qin-Zhi ZHOU Ping-Kun |
| Affiliation: | 1. Beijing Institute of Radiation Medicine, Beijing 100850, China ; 2. Institute of Navy Medicine, Shanghai 200433, China ;3. Instrumental Analysis Center, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100550, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | hHBRK1 F-actins gene mutation fusion protein microfilament proteins polymerase chain reaction |
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