| 金黄色葡萄球菌α-溶血素的表达、纯化及中和性抗体的制备 |
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| 引用本文： | 李迪,高亚萍,靳鹏,董洁,刘玉,杨光. 金黄色葡萄球菌α-溶血素的表达、纯化及中和性抗体的制备[J]. 军事医学科学院院刊, 2014, 0(11) |
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| 作者姓名： | 李迪 高亚萍 靳鹏 董洁 刘玉 杨光 |
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| 作者单位： | 1. 广西医科大学基础医学院，南宁 530021; 军事医学科学院基础医学研究所，北京 100850
2. 军事医学科学院基础医学研究所,北京,100850 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上资助项目 |
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| 摘 要： | 目的：利用大肠杆菌重组表达金黄色葡萄球菌（SAU）重要的外分泌毒力因子α-溶血素（alpha hemolysin， Hla），检测Hla蛋白对不同种属红细胞的裂解作用；制备其特异性抗体，并检测抗体的中和活性。方法以SAU NCTC-8325菌株基因组为模板，PCR扩增hla基因，构建重组表达载体pET-28a-Hla，转化大肠杆菌BL21（DE3），利用IPTG诱导表达，通过Ni2＋柱亲和纯化获得Hla蛋白；通过红细胞裂解实验测定Hla蛋白的溶血活性。结果重组Hla蛋白以可溶形式表达，细胞裂解实验表明，纯化的Hla蛋白可以显著裂解兔红细胞，但人红细胞和羊红细胞对Hla杀伤作用不敏感。 ELISA结果表明，获得了效价较高的多克隆抗体。该抗体可以有效抑制Hla对兔红细胞的裂解作用。结论 SAU的Hla蛋白对不同种属红细胞的溶解能力不同，为探讨Hla裂解细胞的机制给予一定的提示；同时所制备的特异性抗体（ anti-Hla）可以抑制Hla的溶血作用，为深入研究Hla的致病机制奠定了基础。
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| 关 键 词： | 葡萄球菌,金黄色 α-溶血素 溶血活性 抗体 红细胞 |
Expression,purification and antibody preparation of alpha-hemolysin from Staphylo-coccus aureus |
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| LI Di,GAO Ya-ping,JIN Peng,DONG Jie,LIU Yu,YANG Guang. Expression,purification and antibody preparation of alpha-hemolysin from Staphylo-coccus aureus[J]. Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences, 2014, 0(11) |
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| Authors: | LI Di GAO Ya-ping JIN Peng DONG Jie LIU Yu YANG Guang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Staphylococcus aureus alpha hemolysin hemolytic activity antibodies erythrocytes |
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