Notch信号通路对急性B淋巴细胞白血病患者CD4+CD25+CD127dim/-调节性T细胞的调控作用

摘 要：［目的］ 观察急性B淋巴细胞白血病（B-cell acute lymphoblastic leukemia，B-ALL）患者外周血Notch信号通路分子表达和CD4+CD25+CD127dim/-调节性T细胞（regulatory T cells，Treg）水平，评估Notch信号通路对B-ALL患者Treg活性的影响。 ［方法］ 入组31例B-ALL患者和20名对照者，分选血浆和外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells，PBMC），纯化CD4+CD25+CD127dim/- Treg。实时定量PCR法检测PBMC中Notch1~4、Hes1、Hes5 mRNA相对表达量，流式细胞术检测CD4+CD25+CD127dim/- Treg比例，酶联免疫吸附实验检测血浆白细胞介素10（interleukin-10，IL-10）和IL-35水平。使用Notch信号通路抑制剂GSI刺激B-ALL患者分选的PBMC，检测细胞增殖、Treg比例、IL-10和IL-35表达变化。使用GSI刺激B-ALL患者纯化的Treg，与自体PBMC以1∶10比例共培养，检测细胞增殖、IL-10、IL-35、干扰素-γ水平变化。两组间比较采用独立样本t检验或配对t检验。［结果］ B-ALL患者PBMC中Notch受体（包括Notch1、Notch2、Notch3、Notch4）和Notch下游信号分子Hes1、Hes5 mRNA相对表达量均较对照者升高（P<0.001）。B-ALL患者CD4+CD25+CD127dim/- Treg比例高于对照者（8.90%±2.41% vs 4.68%±1.01%，P<0.001）。B-ALL患者外周血IL-10和IL-35水平均高于对照者（P<0.05）。GSI刺激后B-ALL患者PBMC增殖水平与无GSI刺激组差异无统计学意义（P=0.689），但GSI刺激后Treg比例和IL-10、IL-35水平均较无GSI刺激组降低（P<0.05）。使用GSI刺激Treg后与自体PBMC共培养，其抑制PBMC增殖的能力减弱（P<0.001），IL-10和IL-35水平减少（P<0.05），但干扰素-γ水平增加（P<0.001）。［结论］ B-ALL患者外周血中Notch受体表达升高可能诱导CD4+CD25+CD127dim/- Treg数量增加和免疫抑制活性增强。

Modulatory Function of Notch Signaling Pathway to CD4+CD25+CD127dim/- Regulatory T Cells in Patients with B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia