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| 小鼠胚胎大脑皮质活化和静息神经干细胞的初步分离与鉴定 | |
| 作者姓名： | 涂晓萌 李莲莲 李雪 罗祖强 |
| 作者单位： | 1. 温州医科大学附属眼视光医院眼视光学和视觉科学国家重点实验室;2. 温州医科大学附属第一医院病理科 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(No.81571096)；;浙江省自然科学青年基金资助项目(No.LQ14C090005)； |
| 摘 要： | 目的:从小鼠胚胎大脑皮质中分离并鉴定静息和活化的神经干细胞。方法:通过流式细胞术,从胚胎14.5 d的小鼠大脑皮质中分选出大小不同的细胞团;利用免疫荧光技术检测神经干细胞标志物Pax6以及增殖标志物Ki67的表达变化;借助RT-qPCR分析两组细胞中干细胞标志基因Pax6、Oct4、Sox2和Nanog的表达情况;采用流式细胞术及RT-qPCR分析两组细胞所处的周期;体外培养对大、小细胞组进行增殖能力检测。结果:免疫荧光结果表明,分离出的两类细胞均表达Pax6,且大细胞组Ki67为阳性,小细胞组为阴性。细胞周期分析显示,小细胞组G0/G1期比例高于大细胞组,而G2/M期为0,且cyclin A和cyclin B的表达显著低于大细胞组(P<0.05)。体外培养显示,相对于大细胞,小细胞形成的微球数量少,速度慢;大、小细胞形成的微球消化后,Pax6和Ki67染色均阳性,且阳性率无显著差异(P>0.05)。结论:大、小细胞团分别为活化和静息的神经干细胞。活化的干细胞具有较强的增殖能力,而静息干细胞自我复制与增殖能力... |
| 关 键 词： | 神经干细胞 静息 活化 细胞增殖 流式细胞术 |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ | |