桑寄生提取物联合miR-375对骨关节炎软骨细胞活力和凋亡的影响

目的研究桑寄生提取物(SJS)联合微小RNA-375（miR-375）对骨关节炎软骨细胞活力和凋亡的影响及其作用机制。方法将人原代骨性关节软骨细胞RPOC分为对照组（control）组、白细胞介素1β（IL-1β）组、IL-1β+SJS低剂量（SJS-L）组、IL-1β+SJS中剂量（SJS-M）组、IL-1β+SJS高剂量（SJS-H）组、IL-1β+anti-miR-NC组、IL-1β+anti-miR-375组、IL-1β+SJS-H+miR-NC组、IL-1β+SJS-H+miR-375组。MTT检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,qPCR检测miR-375的表达,Westernblot检测细胞周期蛋白D1（cyclinD1）、P21、Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白的水平。结果与control组比较,IL-1β组的RPOC活力(24h、48h和72h)及cyclinD1和Bcl-2蛋白表达明显降低（P<0.05）,而P21、Bax和caspase-3蛋白的水平、细胞凋亡率及miR-375表达量均显著升高（P<0.05）。与IL-1β组比较,IL-1β+SJS-M组和IL-1β+SJS-H组RPOC的活力（24h、48h和72h）和cyclinD1表达显著升高（P<0.05）,P21表达量显著降低（P<0.05）;IL-1β+SJS-H组细胞的凋亡率、Bax及caspase-3蛋白水平、miR-375表达量明显减少（P<0.05）,Bcl-2蛋白水平显著提高（P<0.05）。与IL-1β+anti-miR-NC组比较,IL-1β+anti-miR-375组RPOC中miR-375表达量、P21、Bax、caspase-3蛋白水平、细胞凋亡率明显下降（P<0.05）,cyclinD1、Bcl-2蛋白水平、细胞活力（24h、48h和72h）显著升高（P<0.05）。过表达miR-375能逆转SJS对IL-1β作用的RPOC活力、凋亡的影响。结论桑寄生提取物可以促进IL-1β作用的RPOC活力,并抑制其凋亡,其机制与调控miR-375表达有关。