bFGF对人α1(I)原胶原基因启动子活性的调控

目的　观察bFGF对人皮肤成纤维细胞增殖的影响及调控α1(I)原胶原基因序列的作用。　方法　用组织块法培养人皮肤成纤维细胞并传代，采用BrdU掺入的ELISA法，测定不同浓度的bFGF对成纤维细胞增殖的影响。构建三种人α1(I)原胶原基因5'侧翼序列与报告基因氯霉素乙酰基转移酶(CAT)的重组质粒，用FuGENE转染试剂转染成纤维细胞，同时用p-sv-b-GAL表达质粒转染细胞作为阳性对照组，ELISA法测定经bFGF处理后成纤维细胞CAT的表达量。　结果　在体积分数2%或10%小牛血清培养条件下，bFGF加入浓度从0.25ng/ml增至64.00ng/ml，作用24h后，各组细胞增殖数值之间差异有显著性意义（P<0.05）。用三种重组质粒分别转染细胞，bFGF处理24h后，CAT相对表达量测定结果提示，bFGF组与对照组相比差异有显著性意义（P<0.05）。　结论　bFGF对人皮肤成纤维细胞增殖有抑制作用,对胶原基因启动序列具有负性调控作用，且存在剂量依赖关系。