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| 用T7噬菌体展示筛选系统筛选与靶蛋白相结合的蛋白 | |
| 作者姓名： | 刘靖华 李志杰 刘亚伟 黄浩 邓鹏 秦清和 赵善超 赵克森 姜勇 |
| 作者单位： | 1. 第一军医大学病理生理学教研室 2. 第一军医大学病理生理学教研室和全军休克微循环重点实验室,广东,广州,510515 |
| 摘 要： | 目的 :建立有效的T7噬菌体筛选系统 ,筛选与靶蛋白 (信号分子 )有结合关系的多肽或蛋白。方法 :以p38MAPK、PRAK为靶蛋白 ,分别用不同的介质 (ELISA平板和Ni-NTA亲和树脂 ) ,通过结合 -洗脱 -扩增 3个步骤 ,筛选噬菌体cDNA文库 (T7人肝和 /或人肺cDNA文库 )。结果 :选择第四轮筛选后的洗脱噬菌体单个噬斑克隆 ,经EDTA处理后利用特异性PCR引物扩增插入片断 ,回收PCR产物并进行顺序 ,将获得的序列在美国国立卫生院 (NIH)的GenBank数据库中进行同源序列比较 ,获得若干编码蛋白的序列。在这些蛋白中有激酶、转录因子、细胞骨架… |
| 关 键 词： | T7噬菌体 示筛选系统 筛选 靶蛋白 |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ | |