| SP-D基因真核表达质粒的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 何思思,胡毓华,陆超.SP-D基因真核表达质粒的构建及鉴定[J].江苏医药,2016(4):376-378. |
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| 作者姓名： | 何思思 胡毓华 陆超 |
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| 作者单位： | 南京医科大学第一附属医院儿科 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(81170487);江苏省妇幼保健重点学科项目(FXK201212) |
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| 摘 要： | 目的构建并鉴定含肺表面活性蛋白D(SP-D)基因的重组真核表达质粒。方法提取A549细胞的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增含SP-D基因的cDNA,将产物克隆进真核载体pGEFP-N1内,构建含SP-D基因的重组真核表达质粒。将pGEFP-N1-SP-D重组质粒和pGEFP-N1空载体分别转染293T细胞,Western blot法检测SP-D的蛋白表达。结果双酶切鉴定及核酸序列分析证实,SP-D已成功插入真核载体pGEFP-N1内。转染pGEFP-N1-SP-D的293T细胞中检测到高表达的SP-D蛋白。结论成功构建含SP-D基因的重组真核表达质粒,并能在293T细胞中高表达。
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| 关 键 词： | 肺表面活性蛋白D 真核表达载体 |
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