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Hsp90α基因RNAi的载体构建研究
引用本文:聂滨,曾照芳. Hsp90α基因RNAi的载体构建研究[J]. 重庆医科大学学报, 2007, 32(6): 597-600
作者姓名:聂滨  曾照芳
作者单位:重庆医科大学检验系,临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室、重庆市重点实验室,重庆,400016;重庆医科大学检验系,临床检验诊断学省部共建教育部重点实验室、重庆市重点实验室,重庆,400016
基金项目:致谢:大坪外研七室的老师提供的帮助
摘    要:目的:构建Hsp90α(Heat shock protein 90 alpha)siRNA(Small interfencing RNA)表达载体,为后续的功能研究提供平台.方法:根据Hsp90α基因cDNA序列,设计有小发夹结构的3条寡核苷酸序列到空载体Psuper EGFPI中,转化TOP10菌株,提取质粒,进行酶切鉴定和测序分析.将三条序列和对照序列的质粒分别转染HUK293细胞,提取总RNA,用RT-PCR检测Hsp90 α mRNA的量.结果:经酶切鉴定、电泳证明,含作用序列的重组质粒pSuper-Hsp90 α1,pSuper-Hsp90 α2,及pSuper-Hsp90α3构建是成功的,重组质粒pSuper-Hsp90α 1,pSuper-Hsp90α2测序分析完全正确.用RT-PCR初步证明三条均有干扰效果,pSuper-Hsp90α1最明显.结论:用于Hsp90α RNAi的重组质粒可于体外成功构建,初步确定pSuper-Hsp90α1为最佳作用靶点.

关 键 词:RNA干扰  热休克蛋白90α亚型
文章编号:0253-3626(2007)06-0597-04
修稿时间:2006-01-04

Construction of RNA interference expression vectors of human Hsp90 alpha
NIE Bin,et al. Construction of RNA interference expression vectors of human Hsp90 alpha[J]. Journal of Chongqing Medical University, 2007, 32(6): 597-600
Authors:NIE Bin  et al
Affiliation:Key Laboratory of Laboratory Medical Diagnostics ,Ministry of Education,Chongqing Medical University
Abstract:
Keywords:
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