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CT-1及TTC的GST融合蛋白表达质粒的构建及表达
引用本文:张伟,周跃,张正丰,李鑫兴. CT-1及TTC的GST融合蛋白表达质粒的构建及表达[J]. 免疫学杂志, 2006, 22(1): 101-103
作者姓名:张伟  周跃  张正丰  李鑫兴
作者单位:第三军医大学新桥医院骨科,重庆,400037
摘    要:目的 构建心肌营养素-1(CT-1)和破伤风外毒素C片段(TTC)重组融合蛋白表达质粒。方法 利用PCR、TA克隆等技术将CT-1及TTC基因克隆并连接到pGEX-4T-3,再做酶切鉴定、序列测定。在不同温度不同时间,通过IPTG诱导pGEX-CT-1/TTC在DH5α大肠杆菌中表达,SDS-PAGE分析表达量和可溶性蛋白GSY-CT-1/TTC比例。结果 构建的pGEX-CT-1/TTC酶切结果可见606bp、1356bp大小的片段,与预期结果一致,测序结果表明序列正确。通过IPTG诱导,发现35℃诱导4h,目的蛋白GSY-CT-1/TTC表达量占全菌的1/5,可溶性蛋白与包涵体比为2/5。结论 本实验成功构建了pGEX-CT-1/TTC重组融合质粒,为下一步将其用于脊髓损伤的治疗研究打下了基础。

关 键 词:心肌营养素-1  破伤风外毒素  质粒
文章编号:1000-8861(2006)01-0101-03
收稿时间:2005-08-26
修稿时间:2005-10-08

Construction of GST fusion protein expression plasmid of the cardiotrophin-1 and tetanus toxin C fragment and its expression
ZHANG Wei,ZHOU Yue,ZHANG Zheng-feng,LI Xin-xin. Construction of GST fusion protein expression plasmid of the cardiotrophin-1 and tetanus toxin C fragment and its expression[J]. Immunological Journal, 2006, 22(1): 101-103
Authors:ZHANG Wei  ZHOU Yue  ZHANG Zheng-feng  LI Xin-xin
Affiliation:Department of Orthopaedics, litary Medical University, Chongqing 400037, China
Abstract:
Keywords:Cardiotrophin-1    Tetanus toxin C fragment   Plasmid
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