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人皮肤角质形成细胞的胰蛋白酶消化分离及无血清培养
引用本文:丁锐,沈彤,涂登云,魏凌珍,孙美芳,朱启星.人皮肤角质形成细胞的胰蛋白酶消化分离及无血清培养[J].安徽医科大学学报,2003,38(6):415-418.
作者姓名:丁锐  沈彤  涂登云  魏凌珍  孙美芳  朱启星
作者单位:安徽医科大学公共卫生学院毒理中心实验室,合肥,230032
基金项目:安徽省自然科学基金项目 (编号 :0 3 0 43 80 1),安徽省教育厅自然科学重点科研项目(编号 :2 0 0 3KJ0 3 6ZD)
摘    要:目的 探索用DMEM—SF培养基对经胰蛋白酶两步消化分离的人角质形成细胞进行培养的方法和条件。方法 取临床整形外科手术后剩余皮肤,用0.25%的胰蛋白酶经冷和温两步消化分离后,用DMEM—SF、完全培养基于5%CO2、37℃培养,绘制生长曲线,并用单克隆抗角蛋白抗体和鼠—IgG免疫组化试剂盒进行细胞鉴定。结果 用胰蛋白酶两步消化分离的角质形成细胞在:DMEM—SF、培养基中可正常生长2周以上,生长曲线显示细胞在第4天进入对数生长期,第10天进入停滞期。鉴定显示角质形成细胞占95%以上。来源于3个不同个体的皮肤角质形成细胞经等量混合后培养与单独培养相比,细胞生长无统计学差异。结论 用胰蛋白酶对人皮肤进行冷和温两步消化分离的角质形成细胞,在DMEM—SF完全培养基中生长状况良好,其他细胞污染少,实验成本低廉,操作简单。

关 键 词:人皮肤角质形成细胞  胰蛋白酶  无血清培养  细胞培养  细胞鉴定
文章编号:1000-1492(2003)06-0415-04
修稿时间:2003年8月25日

Human Keratinocytes Culture in DMEM-SF Through Two Step Digestion with Trypsin
Ding Rui,Shen Tong,Tu Dengyun et al.Human Keratinocytes Culture in DMEM-SF Through Two Step Digestion with Trypsin[J].Acta Universitis Medicinalis Anhui,2003,38(6):415-418.
Authors:Ding Rui  Shen Tong  Tu Dengyun
Abstract:
Keywords:human keratinocyte  cell bulture  bell identify
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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