小鼠单链白细胞介素-12重组卡介苗的构建与表达 |
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引用本文: | 张黎,王瑜伟,何永林,李娜,王爽,帖儒修. 小鼠单链白细胞介素-12重组卡介苗的构建与表达[J]. 重庆医科大学学报, 2009, 34(3) |
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作者姓名: | 张黎 王瑜伟 何永林 李娜 王爽 帖儒修 |
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作者单位: | 重庆医科大学附属第一医院眼科,重庆,400016;重庆医科大学基础医学院免疫学教研室,重庆,400016;重庆医科大学基础医学院病原生物学,教研室,重庆,400016 |
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摘 要: | 目的:构建携带小鼠白细胞介素-12基因的重组卡介苗(Bacille calmette-guerin.BCG),并鉴定该重组菌向真核细胞递呈质粒的能力.方法:以分子生物学方法构建携带小鼠IL-12基因和分支杆菌复制子OriM的真核穿梭共表达质粒pBM12,以电转化的方式将pBM12质粒转入BCG构建重组BCG,抽提质粒进行PCR鉴定重组菌;将重组菌感染巨噬细胞,通过RT-PCR了解重组菌向真核细胞递呈质粒的能力.结果:电转化方式可将pBM12导入BCG,抽提质粒鉴定出与mIL-12基因相符的目的条带.以该重组BCG感染小鼠巨噬细胞,96 h后用RT-PCR法也扩增出1632bp左右的基因条带.结论:成功构建含pBM12的重组BCG.该重组BCG能向小鼠巨噬细胞递呈携带基因.
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关 键 词: | 白细胞介素12 重组卡介苗 真核表达 |
Construction and expression of recombinant bacille calmette-guerin carrying murine interleukin-12 |
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