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重组幽门螺杆菌过氧化氢酶脂质体疫苗免疫预防研究
引用本文:黄文,潘雪,李兆申,白杨,王继德,周殿元. 重组幽门螺杆菌过氧化氢酶脂质体疫苗免疫预防研究[J]. 胃肠病学和肝病学杂志, 2005, 14(4): 359-362,365
作者姓名:黄文  潘雪  李兆申  白杨  王继德  周殿元
作者单位:1. 第二军医大学长海医院消化内科,上海,200422
2. 南方医科大学南方医院消化研究所
基金项目:国家自然科学基金(30170890)
摘    要:目的探讨制备脂质体包裹重组幽门螺杆菌过氧化氢酶(Kat)口服疫苗的方法,并用Helicobacterpylori感染的小鼠模型评价其在预防H·pylori感染中的作用。方法将PET_22( )/Kat在BL21(DE3)大肠杆菌表达,表达Kat的包涵体经洗涤、变性、复性,采用QSepharoseFastFlow阴离子交换层析和SephacrylS_200凝胶过滤层析分离纯化Kat重组蛋白,用薄膜分散法制备以卵磷脂和胆固醇为膜组分包裹的Kat重组蛋白口服疫苗,并用透射电镜测定其粒径。BALB/c小鼠分为5组,分别通过灌胃方法给予PBS、空白脂质体、Kat重组蛋白 霍乱毒素(CT)、脂质体包裹Kat重组蛋白、脂质体包裹Kat重组蛋白和CT,每周1次共4次,末次攻击2周再用活H·pylori攻击3次,3周后处死小鼠,行胃组织快速尿素酶试验、H·pylori的定植半定量,取脾组织行淋巴细胞增殖试验。结果以包涵体为主的表达产物占全菌总蛋白的24.4%,经纯化获得纯度为95%的重组蛋白,制备的脂质体粒径为0.7±0.4μm。PBS组和空白脂质体组保护率均为0,而Kat重组蛋白 CT组、脂质体包裹Kat重组蛋白组、脂质体包裹Kat重组蛋白 CT组的保护率分别为73.3%、66.7%和86.7%,且均能使免疫小鼠胃黏膜H·pylori感染数目明显减少,三个疫苗组淋巴细胞增殖试验均为阳性。结论口服脂质体能部分代替免疫佐剂的作用,将其作为H·pylori疫苗的免疫佐剂,具有广泛的应用前景。

关 键 词:幽门螺杆菌  过氧化氢酶  疫苗  脂质体
文章编号:1006-5709(2005)04-0359-04
收稿时间:2005-02-07
修稿时间:2005-02-07

Evalution of immune prophylaxis of the liposomes-encapsulated recombinant Helicobacter pylori catalase protein vaccine
HUANG Wen,PAN Xue,LI Zhaoshen,BAI Yang,Wang Jide,Zhou Dianyuan. Evalution of immune prophylaxis of the liposomes-encapsulated recombinant Helicobacter pylori catalase protein vaccine[J]. Chinese Journal of Gastroenterology and Hepatology, 2005, 14(4): 359-362,365
Authors:HUANG Wen  PAN Xue  LI Zhaoshen  BAI Yang  Wang Jide  Zhou Dianyuan
Affiliation:HUANG Wen,PAN Xue,LI Zhaoshen,BAI Yang,WANG Jide,ZHOU DianyuanDepartment of Gastroenterology,Changhai Hospital,the Second Military Medical University,Shanghai 200433,China
Abstract:
Keywords:Helicobacter pylori  Catalase  Vaccine  Liposome
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