| 基于间充质干细胞的小鼠急性移植物抗宿主病骨髓微环境损伤体外细胞模型的建立与评价策略研究 |
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| 作者姓名： | 田家仪 李佩霖 汤杰 许润香 尹博丰 王飞燕 李晓彤 宁红梅 朱恒 丁丽 |
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| 作者单位： | 1. 河北北方学院研究生院;2. 空军特色医学中心血液科;3. 军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所;4. 空军军医大学研究生院;5. 安徽医科大学基础医学院;6. 解放军总医院血液学部/解放军总医院第五医学中心南院区 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(82172388,81871771,81500083,81572159)；;北京自然科学基金(7242141,7192203,7182123,L212065)； |
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| 摘 要： | 目的:建立小鼠急性移植物抗宿主病(aGVHD)骨髓微环境损伤的体外细胞模型并进行评价。方法:以6-8周龄雌性C57BL/6N小鼠作为骨髓和淋巴细胞的供体，6-8周龄雌性BALB/c小鼠作为aGVHD模型的受鼠。受鼠接受致死剂量(8.0 Gy, 72.76 cGy/min)γ射线全身照射后6-8 h内，尾静脉输注供鼠来源骨髓细胞(1×107/只),建立骨髓移植(BMT)组小鼠模型(n=20);尾静脉输注供鼠来源骨髓细胞(1×107/只)及脾脏淋巴细胞(2×106/只),建立小鼠aGVHD模型(n=20)。造模后d 7麻醉小鼠，摘取眼球取血，静置离心后吸取血清。分离小鼠间充质干细胞(MSC),分别用添加了2%、5%和10%的BMT组血清和相同浓度的aGVHD组血清的培养基进行培养。通过成纤维细胞集落形成实验(CFU-F)评价两组血清对MSC集落形成能力的影响；通过CD29和CD105免疫荧光染色评价两组MSC表面分子表达的差异；通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测MSC自我更新相关基因Oct-4、Sox-2和Nano...
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| 关 键 词： | 辐射 造血干细胞移植 急性移植物抗宿主病 骨髓微环境 间充质干细胞 自我更新 |
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