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附睾特异分泌蛋白Lipocalin13的原核表达和纯化及其与配体结合特性的分析
引用本文:曹旭,林东海.附睾特异分泌蛋白Lipocalin13的原核表达和纯化及其与配体结合特性的分析[J].药物生物技术,2010(2).
作者姓名:曹旭  林东海
作者单位:中国药科大学生命科学与技术学院;中国科学院上海药物研究所;厦门大学化学化工学院;
基金项目:国家自然科学基金资助项目(NO.30730026); 中科院知识创新工程重要方向项目(No.KSCX1-YW-R-54)
摘    要:大鼠Lipocalin13(rLcn13)是最近发现的一个大鼠附睾特异分泌的lipocalin家族蛋白,与男性生殖密切相关。该工作分析了rLcn13的染色体定位和基因特征,用同源模建方法获得了rLcn13蛋白的三级结构,并构建了rLcn13蛋白的原核表达系统,对rLcn13蛋白进行了可溶表达和纯化,并研究了rLcn13蛋白的配体结合特性。结果表明:(1)rLcn13蛋白在原核表达系统中能实现可溶性表达,并具有良好的三级结构;(2)rLcn13蛋白的二级结构以β-折叠为主;(3)rLcn13蛋白具有较强的视黄酸结合能力,也能结合其它一些lipocalin蛋白的配体;(4)rLcn13蛋白在大鼠附睾中可能起着视黄酸结合和转运作用,并有可能参与免疫反应。该研究为rLcn13蛋白的三维结构解析及其生理功能以及其它lipocalin家族蛋白的结构与功能关系的研究奠定了基础。

关 键 词:Lipocalin13蛋白  原核表达和纯化  配体结合特性  视黄酸  

Expression,Purification and Ligand-Binding Characteristics of A Novel Epididymal Protein Lipocalin13
CAO Xu,LIN Dong-hai,.Expression,Purification and Ligand-Binding Characteristics of A Novel Epididymal Protein Lipocalin13[J].Pharmaceutical Biotechnology,2010(2).
Authors:CAO Xu  LIN Dong-hai    
Institution:CAO Xu1,LIN Dong-hai1,2,3,(1.School of Life Science , Technology,China Pharmaceutical University,Nanjing 210009,China,2.Shanghai Institute of Materia Medica,Chinese Academy of Science,Shanghai 201203,3.The Key Laboratory for Chemical Biology of Fujian Province,Department of Chemical Biology,School Chemistry , Chemical Engineering,Xiamen University,Xiamen 361005,China)
Abstract:Lipocalin13 is a novel epididymal-specific expressed lipocalin protein and is potentially related to male reproduction.In the present work,the location and characterization of the rat lcn13 gene were analyzed and a homology structure of the rLcn13 protein was built.Moreover,a potent expression system for rLcn13 was constructed,the rLcn13 proteins of 95% purity,were successfully obtained and the intermolecular interaction of rLcn13 with diverse ligands was detected.Our results indicated that:(1) The recombin...
Keywords:Lipocalin13  Expression and purification  Ligand binding  Retinoic acid  
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