优化的套式核酸体外扩增方法用于甲型流感病毒快速诊断的研究 |
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引用本文: | 李先茜,康向东,董婕,杜培革,王笑英.优化的套式核酸体外扩增方法用于甲型流感病毒快速诊断的研究[J].国外医学(流行病学.传染病学分册),2005,32(2):73-76. |
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作者姓名: | 李先茜 康向东 董婕 杜培革 王笑英 |
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作者单位: | [1]上海市普陀区中心医院检验科200062 [2]国家疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家流感中心,北京,100052 [3]北华大学医学院,吉林,132012 [4]吉林省人民医院,长春,130021 |
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摘 要: | 目的临床上对流感的有效控制与治疗在于实验室快速与准确的诊断,这对于指导用药和避免滥用抗生素具有重要意义。RT-PCR在流感病毒检测中特异性和灵敏度较强,nested multirplex RT-PCR法可以在此基础上提高灵敏度。实验的目的是应用分子生物学方法对流感病毒进行快速诊断。方法我们结合流感病毒M基因、NS基因、HA基因的结构和进化特性设计多元引物达到流感病毒的型和亚型准确与快速的鉴定。结果甲型流感病毒以M基因保守区域设计引物,PCR后电泳带为413bp;甲型流感病毒以HA基因分亚型,H1N1亚型PCR后电泳带为348bp,H3N2亚型PCR后电泳带为291bp,H5N1亚型PCR后电泳带为326bp。结论应用优化的套式核酸体外扩增方法进行流感病毒的型与亚型的诊断是比较快速的,且所需要的病毒量少(0.01~0.1TCID50),灵敏度较高。
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关 键 词: | 甲型流感病毒 快速诊断 扩增方法 体外 核酸 套式 优化 RT-PCR法 分子生物学方法 流感病毒M基因 nested H3N2亚型 滥用抗生素 基因保守区 有效控制 重要意义 指导用药 病毒检测 高灵敏度 NS基因 HA基因 设计引物 H1N1 H5N1 |
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