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MicroRNA-199a-3p对脉络膜黑色素瘤细胞增殖的抑制作用
引用本文:王教,王丽花,曹琼洁,赵云萍,陈林华.MicroRNA-199a-3p对脉络膜黑色素瘤细胞增殖的抑制作用[J].中华眼视光学与视觉科学杂志,2019,21(8):569-575.
作者姓名:王教  王丽花  曹琼洁  赵云萍  陈林华
作者单位:Jiao Wang, Lihua Wang, Qiongjie Cao, Yunping Zhao, Linhua Chen
基金项目:Science and Technology Project of Wenzhou (Y20130254)
摘    要:目的:探讨MicroRNA-199a-3p(miR-199a-3p)对脉络膜黑色素瘤细胞OCM290增殖的影响及机制。 方法:实验研究。首先采用Real-time PCR技术检测miR-199a-3p在正常的脉络膜黑色素细胞UM96和肿瘤细胞OCM290中的表达情况;其次采用阳离子脂质体Lipofectamine介导的转染方法,将miR- 199a-3p转染入体外培养的人脉络膜黑色素瘤细胞OCM290中过表达作为实验组,将随机序列寡核苷酸链转染入OCM290细胞作为阴性对照组;然后在转染的基础上运用细胞增殖实验法(MTS法)、克隆形成实验检测细胞增殖和生长能力。流式细胞术检测细胞周期。Western blot法检测与细胞周期相关的信号蛋白如CDK2、CDK4、E2F1等的表达。组间数据比较采用独立样本t检验。结果:miR-199a-3p在UM96中高表达,而在OCM290中表达明显下调(t=13.2,P<0.001)。OCM290细胞转染 miR-199a-3p后,MTS结果显示实验组细胞数为对照组的(23.8±1.7)%,细胞增殖明显被抑制(t=78.1,P<0.001);细胞克隆数减少;细胞周期滞留在G1期(t=-8.5,P=0.001);Western blot法检测发现miR-199a-3p能下调OCM290中CDK2、CDK4、E2F1等的表达水平(t=10.3,P=0.001;t=9.9,P=0.001; t=10.4,P<0.001)。结论:miR-199a-3p通过下调调控细胞周期进程的关键蛋白,影响细胞周期的进程,从而抑制脉络膜黑色素瘤细胞的增殖。

关 键 词:MicroRNA-199a-3p  脉络膜黑色素瘤  增殖  
收稿时间:2018-09-30

MicroRNA-199a-3p Inhibits Proliferation of Uveal Melanoma Cells
Jiao Wang,Lihua Wang,Qiongjie Cao,Yunping Zhao,Linhua Chen.MicroRNA-199a-3p Inhibits Proliferation of Uveal Melanoma Cells[J].Chinese Journal of Optometry Ophthalmology and Visual Science,2019,21(8):569-575.
Authors:Jiao Wang  Lihua Wang  Qiongjie Cao  Yunping Zhao  Linhua Chen
Institution:Eye Hospital, Wenzhou Medical University, State Key Laboratory of Ophthalmology, Optometry and Vision Science, Wenzhou 325027, China
Abstract:
Keywords:
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