microRNA⁃449a通过调控MDM4抑制神经母细胞瘤生长

目的：研究microRNA?449a（miR?449a）对神经母细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法：在BE（2）?C细胞中过表达miR?449a后通过实时荧光定量PCR（quantitative real?time PCR，qPCR）分析基因表达水平的变化，MTT分析细胞活力，克隆形成试验观察肿瘤细胞增殖能力，同时，采用microRNA靶标预测和功能注释数据库miRDB预测miR?449a潜在靶向基因，对靶基因MDM4进行过表达和干扰表达后，Western blot分析相关蛋白表达水平，流式细胞术分析细胞凋亡。结果：miR?449a过表达抑制细胞增殖及克隆形成。经过软件预测和实验验证，证实MDM4为miR?449a的1个靶基因。另外干扰MDM4表达后亦可以抑制细胞增殖和克隆形成。过表达MDM4可以抵消由转染miR?449a模拟物所引起的细胞凋亡和p53蛋白量的增加。miR?449a可以促进BE（2）?C细胞凋亡，但是在稳定干扰p53表达的细胞株没有观察到这种效应。结论：miR?449a通过靶向调控MDM4基因进而稳定p53蛋白从而促进肿瘤细胞凋亡，提示miR?449a可能作为神经母细胞瘤潜在治疗靶标之一。