| 地高辛标记的小鼠β-1,4-半乳糖基转移酶RNA探针的制备和应用 |
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| 引用本文： | 沈爱国,龚蕾蕾,丁斐,严美娟,王汉洲,顾建新.地高辛标记的小鼠β-1,4-半乳糖基转移酶RNA探针的制备和应用[J].神经解剖学杂志,2003(4). |
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| 作者姓名： | 沈爱国 龚蕾蕾 丁斐 严美娟 王汉洲 顾建新 |
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| 作者单位： | 南通医学院，江苏省神经再生重点实验室，南通医学院，江苏省神经再生重点实验室，南通医学院，江苏省神经再生重点实验室，南通医学院，江苏省神经再生重点实验室，复旦大学上海医学院基因研究中心，复旦大学上海医学院基因研究中心 南通226001，复旦大学上海医学院基因研究中心，上海200032，南通226001，南通226001，南通226001，上海200032，上海200032 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 ( No.3 0 3 0 0 0 99)，江苏省自然科学基金 ( BK2 0 0 3 0 3 5 )，江苏省教育厅自然科学项目 ( O3 KJB180 10 9)资助项目 |
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| 摘 要： | 为了制备小鼠 β-1,4-半乳糖基转移酶 ( β-1,4-galactosyltransferase ,β-1,4-Gal T- )地高辛标记的 RNA探针以探讨β-1,4-Gal T- m RNA在坐骨神经组织的表达定位 ,本研究用提取的小鼠脑总 RNA,采用 RT-PCR方法 ,得到β-1,4-Gal T- 的 DNA片断 ,将其克隆到 p GEM-T载体 ;采用体外转录的方法合成地高辛标记的正、反义β-1,4-Gal T- RNA探针 ;运用点杂交的方法分析标记探针的灵敏度 ;最后应用该探针 ,通过原位杂交的方法 ,分析 β-1,4-Gal T- m RNA在小鼠坐骨神经的表达。结果 :构建了β-1,4-Gal T- /p GEM-T质粒 ,获得了高效价的地高辛标记的正、反义β-1,4-Gal T- RNA探针 ,应用该探针发现 β-1,4-Gal T- 在小鼠坐骨神经髓鞘中有表达。以上结果表明 ,制备的地高辛标记的正、反义 β-1,4-Gal T- RNA原位杂交探针可特异地检测β-1,4-Gal T- m RNA在组织中的表达。本研究为进一步分析β-1,4-Gal T- 在坐骨神经及其它神经组织发育和损伤过程中的表达奠定基础。
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| 关 键 词： | β-1 4-半乳糖基转移酶- RNA原位杂交探针 RT-PCR 地高辛标记 小鼠 |
THE PREPARATION OF RNA PROBES OF THE SENSE AND ANTISENSE β-1, 4-GALACTOSYLTRANSFERASE Ⅰ LABELED WITH DIGOXIGENIN |
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| Shen Aiguo ,Gong Leilei ,Ding Fei ,Yan Meijuan ,Wang Hanzhou ,Gu Jianxin.THE PREPARATION OF RNA PROBES OF THE SENSE AND ANTISENSE β-1, 4-GALACTOSYLTRANSFERASE Ⅰ LABELED WITH DIGOXIGENIN[J].Chinese Journal of Neuroanatomy,2003(4). |
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| Authors: | Shen Aiguo Gong Leilei Ding Fei Yan Meijuan Wang Hanzhou Gu Jianxin |
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| Institution: | Shen Aiguo 1,2,Gong Leilei 1,Ding Fei 1,Yan Meijuan 1,Wang Hanzhou 2,Gu Jianxin 2 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | β-1 4- galactosyltransferase Ⅰ RNA probe RT-PCR digoxigenin label mouse |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
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