转录因子ETS1 RNA干扰质粒的构建及其稳定转染胰腺癌细胞株的建立 |
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引用本文: | 王钟晗,王彩莲,陈蓉,周旻,陈岩.转录因子ETS1 RNA干扰质粒的构建及其稳定转染胰腺癌细胞株的建立[J].世界华人消化杂志,2013(27):2820-2825. |
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作者姓名: | 王钟晗 王彩莲 陈蓉 周旻 陈岩 |
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作者单位: | 东南大学附属中大医院肿瘤中心 |
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基金项目: | 江苏省自然科学基金资助项目,No.BK2011604~~ |
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摘 要: | 目的:构建针对人转录因子ETS1的RNA干扰质粒,鉴定并建立干扰质粒稳定转染的人胰腺癌PANC-1细胞株.方法:分别构建3条针对ETS1基因的shRNA干扰质粒(shRNA-1,shRNA-2,shRNA-3),并将其转染至人胰腺癌PANC-1细胞株,用药物G418筛选出稳定细胞株,Western blot鉴定稳转细胞株中ETS1表达量.结果:3条针对ETS1基因的shRNA干扰质粒转染胰腺癌PANC-1细胞株后,Western blot检测结果显示干扰质粒1(shRNA-1)具有最佳干扰效果.将具有最佳干扰效果的质粒稳定转染人胰腺癌PANC-1细胞株后,经Western blot鉴定相较于对照组稳定细胞株其ETS1表达量明显降低.结论:成功构建了针对人转录因子ETS1的RNA干扰质粒,并建立其稳定转染的人胰腺癌PANC-1细胞株.
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关 键 词: | 胰腺癌 ETS1转录因子 RNA干扰 稳定转染 PANC-1 |
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