| CDC25B3基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 张齐,范健,石欣,孔波,肖志,杨正平. CDC25B3基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定[J]. 江苏医药, 2009, 35(7) |
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| 作者姓名： | 张齐 范健 石欣 孔波 肖志 杨正平 |
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| 摘 要： | 目的 构建CDC25B3基因RNAi慢病毒载体.方法 合成CDC25B3基因RNAi有效靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与双酶切后的pGCL-GFP载体(含有U6启动子和GFP基因)连接产生LV-shCDC25B3慢病毒载体,挑选阳性克隆经PCR和测序鉴定.用脂质体转染法将LV-shCDC25B3、pHelper 1.0和pHelper 2.0质粒共转染293T细胞,产生慢病毒,以293T细胞绿色荧光蛋白的表达水平测定病毒滴度.结果 PCR和测序证实,成功地构建了CDC25B3 shRNA的慢病毒载体LV-shCDC25B3.浓缩病毒悬液的滴度为1×108TU/ml.结论 成功构建人CDC25B3基因RNAi慢病毒载体.
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| 关 键 词： | RNA干扰 CDC25B 胰腺癌 慢病毒 |
Construction and identification of lentiviral vector of RNA interference of CDC25B3 gene |
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