穗花杉双黄酮激活PPAR-α/γ抑制THP-1源性巨噬细胞向M1型极化

目的 探讨穗花杉双黄酮调节体外诱导的M1型巨噬细胞极化的相关机制。方法 设实验组、溶媒对照组和无药对照组，实验组：不同浓度的（5、10 μmol/L）穗花杉双黄酮干预用联合脂多糖及重组人干扰素-γ诱导的M1型巨噬细胞；溶媒对照组：溶媒3‰DMSO；无药对照组：不加穗花杉双黄酮处理。显微镜下观察细胞形态学；通过ELISA检测干预后细胞上清液L-6、IL-10、TNF-α、TGF-β各自的表达水平；通过CCK-8法检测计算出穗花杉双黄酮对细胞的安全浓度；通过分子对接建模确定穗花杉双黄酮的靶蛋白，利用RT-qPCR、Western blot检测L-6、IL-10、TNF-α、TGF-β、PPAR-α/γ、Arg-1、Fizz1基因和蛋白表达。结果 穗花杉双黄酮干预后可以阻止被诱导引起的THP-1细胞向M1极化；穗花杉双黄酮可下调M1极化时高表达的IL-6、TNF-α的mRNA，上调M2型主要标志细胞因子IL-8和TGF-β的mRNA表达（P<0.05），同时上调M1极化状态下的细胞内Arg1和Fizz1蛋白的表达（P<0.05）。随着穗花杉双黄酮浓度的增加和作用时间的延长，其抑制细胞的增殖效果增强（P<0.05），且高浓度具有杀伤作用。穗花杉双黄酮可与PPAR-α/γ关键靶点蛋白活性位点非共价结合并激活该蛋白。结论 穗花杉双黄酮可通激活PPAR-α/γ，恢复Arg-1、Fizz1基因表达，抑制巨噬细胞向M1型分化。