吡非尼酮通过下调TGF-β/Smad通路中TGF-β3的表达抑制兔Tenons囊成纤维细胞增殖

目的 探讨吡非尼酮在抗青光眼滤过术后抑制瘢痕形成的可能机制。方法 体外培养兔眼Tenons囊成纤维细胞(RYTF)；设计6组不同浓度的吡非尼酮作为实验组、1组未加入吡非尼酮的作为对照组及1组调零组，采用CCK-8检测法初步确定吡非尼酮的起始作用浓度及最适作用浓度；采用免疫荧光法检测经起始、最适作用浓度吡非尼酮作用后RYTF中TGF-β3，Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白与对照组相比的荧光染色表达情况；通过 Western blot 法检测经起始、最适作用浓度吡非尼酮作用后 TGF-β3，CollagenⅠ、CollagenⅢ 因子与对照组相比的蛋白表达情况；通过 RT-PCR 法检测经起始、最适作用浓度吡非尼酮作用后TGF-β3、CollagenⅠ、CollagenⅢ与对照组相比的mRNA表达变化。结果 吡非尼酮抑制RYTF增殖的起始作用浓度和最适作用浓度分别为 0.1 mg 和 0.27 mg；与对照组相比，经起始、最适作用浓度吡非尼酮作用 24 h 后，实验组 RYTF 中 TGF-β3、CollagenⅠ、Collagen Ⅲ 的荧光表达均少于对照组（P<0.05）；与对照组相比，经起始、最适作用浓度吡非尼酮作用24 h后，实验组RYTF中TGF-β3、CollagenⅠ、CollagenⅢ 的蛋白表达量均少于对照组（P<0.05）；与对照组相比，经起始、最适作用浓度吡非尼酮作用24h后，实验组RYTF中TGF-β3、CollagenⅠ、Collagen Ⅲ 的基因相对表达量均少于对照组（P<0.05）。结论 吡非尼酮对体外培养RYTF增殖有明显抑制作用，且呈浓度依赖关系；吡非尼酮抑制RYTF增殖的机制可能是通过影响RYTF中TGF-β/Smad途径上TGF-β3效应因子的基因和蛋白表达。