ANGPTIA基因对不同肝癌细胞株生长的影响

目的：观察血管生成素样蛋白4（angiopoietin-like4，ANGPTL4）基因对不同肝癌细胞株生长的影响。方法：用RT—PCR和Western印迹法检测9种不同肝癌细胞及永生化肝细胞中ANGPTL4的表达水平；选择ANGPTL4低表达的Huh-7、MHCC—LM3和中度表达的MHCC-97L共3个肝癌细胞株，以pEGFP-N1质粒为载体，用Lipofectamine2000脂质体转染ANGPTL4基因，用G418筛选结合FCM法对转染阳性细胞进行筛选，建立过表达ANGPTL4的稳定细胞株。制备细胞芯片，用Ki-67荧光免疫细胞化学技术检测3个稳定细胞株的体外增殖率，用裸小鼠体内成瘤实验观察ANGPTL4对这3个细胞株在裸小鼠体内生长的影响。结果：ANGPTL4mRNA在未转染肝癌细胞Huh-7和MHCC-LM3中低表达，在MHCC-97L细胞中中度表达，在Hep3B细胞中高表达。细胞芯片检测结果表明，与空载体组相比，稳定过表达ANGFFL4的Huh-7细胞体外增殖率较低（P=0．00074），而稳定过表达ANGPTL4的MHCC—LM3（P=0．07308）和MHCC-97L（P=0．01152）细胞株的体外增殖率则较高。体内实验证实，ANGPTL4可以明显抑制Huh-7细胞的裸鼠体内成瘤（P=0．00110），而促进MHCC-LM3细胞（P=0．05750）和MHCC-97L细胞（P=0．01891）的裸鼠体内成瘤。结论：ANGPTL4对不同肝癌细胞株的生长有不同影响，而对同一种细胞株体内和体外生长的影响基本一致。