人细胞间黏附分子-1表达载体的构建及在真核细胞的表达 |
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引用本文: | 陈志鸿.人细胞间黏附分子-1表达载体的构建及在真核细胞的表达[J].国际遗传学杂志,2008,31(6). |
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作者姓名: | 陈志鸿 |
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作者单位: | 牡丹江医学院; |
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摘 要: | 目的:构建人细胞间黏附分子-1真核表达载体pcDNA3.1(-)-ICAM-1,在真核细胞中表达人细胞间黏附分子-1。方法:设计特异性引物,利用PCR技术扩增出ICAM-1全编码区基因片段,插入到真核表达载体pcDNA3.1(-)中,重组质粒pCDA3.1(-)-ICAM-1用脂质体转染法转染哺乳动物细胞,以间接免疫荧光(IFA)和Western blot分析蛋白质的的表达。结果:PCR扩增得到人成熟ICAM-1的cDNA片段大小为1800bp, 重组子经酶切鉴定和DNA序列分析得到真核表达载体pCDA3.1(-)-ICAM-1。结论:成功构建了人ICAM-1真核表达载体,ICAM-1高效表达在转染的哺乳动物COS-7细胞表面,为进一步建立稳定表达ICAM-1的COS-7细胞株以及研究ICAM-1及其受体的生物学功能提供了条件。
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收稿时间: | 2007-3-5 |
修稿时间: | 2008-6-26 |
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