谷胱甘肽对糖基化终产物诱导平滑肌细胞增殖的影响

目的探讨糖基化终产物(AGEs)对大鼠胸主动脉平滑肌细胞的增殖作用和还原型谷胱甘肽(GSH)对AGE介导的动脉平滑肌细胞增殖作用的抑制机制。方法以体外培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞为实验模型,分为8组,每组12孔,每孔细胞密度1×10~5/mL,与不同浓度的糖基化终产物共同培养,并用不同浓度的谷胱苷肽干预。分别用噻唑蓝(MTT)比色法测定血管平滑肌细胞增殖和用夹心ELISA方法测定细胞的磷酸化P38丝裂素蛋白激酶(P-P38 MAPK)的浓度来探讨平滑肌增殖的机制和干预因素。结果 (1)AGEs对血管平滑肌细胞MTT吸光度的影响:经过AGEs干预,与对照组比较,血管平滑肌细胞MTT的吸光度(OD)值增高(P<0.01),分别为:B组0.43±0.146,C组0.49±0.16,D组0.48±0.185。但随着AGEs浓度增加,B、C、D组间MTT OD值无统计学上差异(P>0.05)。(2)GSH对AGEs干预的血管平滑肌细胞MTT吸光度的影响:在加入GSH的AGEs干预组,F、G、H组与AGEs(25 mg/L)对照组比较,MTT吸光度下降(P<0.01),分别是F组0.347±0.102,G组0.333±0.108,H组0.285±0.08。但随着GSH浓度增加,F、G、H组组间无统计学差异(P>0.05)。(3)AGEs对血管平滑肌细胞内P-P38 MAPK的影响:经过AGEs干预后,p-p38MAPK吸光度增加(P<0.01),B组0.65±0.17,C组0.85±0.26,D组0.94±0.17,分别为对照组0.26±0.06的2.5、3.2和3.6倍(P<0.01)。随AGEs浓度增加,C、D组与B组相比,P-P38有显著增加(P<0.01)。(4)GSH对AGEs干预的血管平滑肌细胞内P-P38的影响:在加入GSH的AGEs干预组,F、G、H组与B组即AGEs对照组比较,p-p38 MAPK吸光度降低(P<0.01),分别是F组0.356±0.09 G组0.281±0.07 H组0.256±0.072,与对照组相比分别下降45%,56%,60%(P<0.01)。随着GSH浓度增加,G、H组与F组相比,p-p38MAPK逐渐降低(P<0.01)。结论 (1)AGEs具有促进血管平滑肌细胞增值的作用,其作用机理可能与激活了P-P38MAPK信号传导通路有关。(2)GSH对AGEs介导的血管平滑肌细胞增值