| 尿路致病性大肠杆菌iha基因敲除及其对细菌生物膜形成的影响 |
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| 引用本文： | 张晓雷,毛立群,葛新,董小青. 尿路致病性大肠杆菌iha基因敲除及其对细菌生物膜形成的影响[J]. 第二军医大学学报, 2013, 34(6): 671-675 |
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| 作者姓名： | 张晓雷 毛立群 葛新 董小青 |
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| 作者单位： | 武警后勤学院病原生物与免疫学教研室,天津,300162 |
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| 基金项目： | 武警后勤学院科研基金面上项目(WHM201202).Supported by Science Foundation of Logistics College of Chinese People's Armed Police Force |
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| 摘 要： | 目的构建尿路致病性大肠杆菌(UPEC)W140菌株的黏附素基因iha缺陷株,分析iha基因缺失对UPEC生物膜形成的影响。方法采用Red重组系统的3种质粒(pKD46、pKD3、pCP20)敲除W140菌株的iha基因。pKD46表达λ噬菌体的3个重组蛋白,转入W140菌株使其具有同源重组能力。以pKD3携带的两侧带有翻转酶结合位点(FRT)的氯霉素抗性基因替换目的基因iha,再利用表达翻转酶重组酶的质粒pCP20将FRT之间的氯霉素抗性基因删除,从而获得iha基因敲除菌株。采用结晶紫染色法比较野生菌株与基因敲除菌株的细菌生物膜形成差异。结果 PCR验证和DNA测序表明,UPEC W140菌株染色体上的iha基因被成功敲除,得到iha基因缺陷株UPEC W140Δiha。基因缺陷菌株与野生菌株相比生物膜形成能力降低(P<0.01)。结论 iha基因及其编码产物参与UPEC生物膜的形成,通过抑制该基因的表达有望为控制尿路感染提供新的靶点。
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| 关 键 词： | 大肠杆菌 生物膜 尿路感染 基因敲除 |
| 收稿时间： | 2012-12-01 |
| 修稿时间： | 2013-03-19 |
Knockout of the iha gene in uropathogenic Escherichia coli and its influence on biofilm formation |
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| ZHANG Xiao-lei,MAO Li-qun,GE Xin and DONG Xiao-qing. Knockout of the iha gene in uropathogenic Escherichia coli and its influence on biofilm formation[J]. Former Academic Journal of Second Military Medical University, 2013, 34(6): 671-675 |
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| Authors: | ZHANG Xiao-lei MAO Li-qun GE Xin DONG Xiao-qing |
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| Affiliation: | Department of Pathogenic Biology and Immunology,Logistics College of Chinese People’s Armed Police Force,Tianjin 300162,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Escherichia coli biofilms urinary tract infection gene knockout |
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