| 基于ITS序列位点特异性PCR的酸枣仁及其混伪品的鉴别 |
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| 引用本文： | 李桂林,宋雅迪,吕振晖,刘春晖,李佳,张夏楠.基于ITS序列位点特异性PCR的酸枣仁及其混伪品的鉴别[J].中国现代中药,2016,18(12):1566-1570. |
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| 作者姓名： | 李桂林 宋雅迪 吕振晖 刘春晖 李佳 张夏楠 |
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| 作者单位： | 首都医科大学 中医药学院，北京100069,首都医科大学 中医药学院，北京100069,首都医科大学 中医药学院，北京100069,首都医科大学 中医药学院，北京100069,首都医科大学 中医药学院，北京100069,首都医科大学 中医药学院，北京100069 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（81303166）；国家中医药管理局中医药行业专项（201407003） |
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| 摘 要： | 目的:基于ITS序列建立酸枣仁及其市场混伪品的分子鉴定方法。方法:收集酸枣仁及其常见混伪品理枣仁、枳椇子、紫荆子、兵豆,提取总DNA,基于ITS序列设计引物并进行PCR扩增,对扩增产物进行测序,用Bio Edit分析软件进行序列比对,针对变异位点用Primer Premier 5.0设计特异性鉴别引物,进行PCR反应并考察反应条件。结果:ITS序列可以用于酸枣仁及其易混淆品种的鉴别研究,在位点特异性PCR反应条件考察中,DNA模板用量范围应为0.7~2.1 ng·μL-1,退火温度在59℃时特异性最佳,实验建立的方法对不同Taq酶和PCR仪具有普遍适应性。结论:研究设计的位点特异性引物在一定条件下的PCR反应中,酸枣仁能扩增出66 bp的条带,而其他混伪品不能扩增出条带,从而实现了酸枣仁与其混伪品的快速、准确鉴别。
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| 关 键 词： | 酸枣仁 ITS 特异性PCR 分子鉴定 |
| 收稿时间： | 2016/1/18 0:00:00 |
Identification of Zizyphus jujuba with the Counterfeit Products byAllele-specific PCR Based on ITS Genes Sequence |
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| LI Guilin,SONG Yadi,LYU Zhenhui,LIU Chunhui,LI Jia and ZHANG Xianan.Identification of Zizyphus jujuba with the Counterfeit Products byAllele-specific PCR Based on ITS Genes Sequence[J].Modern Chinese Medicine,2016,18(12):1566-1570. |
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| Authors: | LI Guilin SONG Yadi LYU Zhenhui LIU Chunhui LI Jia and ZHANG Xianan |
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