上调microRNA-205表达对HeLa细胞生物学特性的影响 |
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作者姓名: | 孙小丽 林仲秋 吴维光 |
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作者单位: | 中山大学附属第二医院妇科肿瘤专科,广东广州510120 |
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摘 要: | 【目的】探讨上调microRNA-205(miR-205)表达对HeLa细胞生物学特性的影响。【方法】实验分4组:miR-205上调组,阴性对照组,空白转染组和空白对照组。每种检测重复3次。利用脂质体siPORT NeoFX Transfection Agent,向miR-205上调组细胞转染Pre-miR-hsa-miR-205 miRNA Precursor,阴性对照组细胞转染Cy3 dye labeled PremiR Negative Control。荧光显微镜下评估转染情况,实时定量PCR方法检测miR-205表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和平板克隆形成实验分别检测细胞生长和增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期分布,Transwell小室法检测细胞迁移能力。【结果】实时定量PCR结果显示,miR-205上调组miR-205的表达增加3061.5倍。与空白对照组相比,72hmiR-205上调组与阴性对照组活细胞数分别为(126±41)%,(126±39)%;两组克隆形成率分别为(79±11)%,(63±10)%;凋亡率分别为(4.6±2.1)%,(4.1±2.4)%;S期细胞比例分别为(19.2±3.6)%,(23.4±3.0)%;200倍镜视野下迁移细胞数分别为63±17和68±16。与对照组比,miR-205上调组细胞增殖能力增强但生长曲线不受影响,S期细胞比例降低,而凋亡率不变,细胞迁移能力无明显改变。【结论】上调miR-205表达后,HeLa细胞增殖能力及细胞周期改变,但生长曲线、凋亡率和迁移能力无变化。
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关 键 词: | HeLa细胞 miR-205 生物学 调控 |
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