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酵母双杂交系统筛选FOXP3的相互作用蛋白
引用本文:周丽娜,吴军,贺伟峰,罗高兴,陈希炜,柏干苹,袁顺宗,张小容,胡晓红.酵母双杂交系统筛选FOXP3的相互作用蛋白[J].第三军医大学学报,2008,30(24):2258-2261.
作者姓名:周丽娜  吴军  贺伟峰  罗高兴  陈希炜  柏干苹  袁顺宗  张小容  胡晓红
作者单位:第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,疾病蛋白质组重庆市市级重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,疾病蛋白质组重庆市市级重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,疾病蛋白质组重庆市市级重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,疾病蛋白质组重庆市市级重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,疾病蛋白质组重庆市市级重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,疾病蛋白质组重庆市市级重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,疾病蛋白质组重庆市市级重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,疾病蛋白质组重庆市市级重点实验室,重庆,400038;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,疾病蛋白质组重庆市市级重点实验室,重庆,400038
基金项目:国家自然科学基金  
摘    要:目的 利用酵母双杂交系统筛选与人FOXP3相互作用的蛋白.方法 应用酵母双杂交系统,将成功构建的酵母诱饵表达载体pGBKT7-FOXP3,与转化了成人肝cDNA文库的酵母菌Y187接合,筛选与FOXP3相互作用的蛋白,通过一对一的回复性杂交实验排除假阳性,并对阳性克隆进行序列测定和生物信息学分析.结果 经过酵母双杂交共获得最终确认3个阳性克隆,测序后经生物信息分析为肿瘤蛋白D52、分裂因子3b及未知蛋白.结论 成功应用酵母双杂交系统筛选出与FOXP3相互作用的3个蛋白,它们可能与Treg细胞的发育分化及其功能有关.

关 键 词:基因  克隆  FOXP3  酵母双杂交

Identification of interacting protein of FOXP3 by yeast two-hybrid system
ZHOU Lina,WU Jun,HE Wei-feng,LUO Gao-xing,CHEN Xi-wei,BAI Gan-ping,YUAN Shun-zong,ZHANG Xiao-rong,HU Xiao-hong.Identification of interacting protein of FOXP3 by yeast two-hybrid system[J].Acta Academiae Medicinae Militaris Tertiae,2008,30(24):2258-2261.
Authors:ZHOU Lina  WU Jun  HE Wei-feng  LUO Gao-xing  CHEN Xi-wei  BAI Gan-ping  YUAN Shun-zong  ZHANG Xiao-rong  HU Xiao-hong
Institution:ZHOU Li-na,WU Jun,HE Wei-feng,LUO Gao-xing,CHEN Xi-wei,BAI Gan-ping,YUAN Shun-zong,ZHANG Xiao-rong,HU Xiao-hong (State Key Laboratory of Trauma,Burns , Combined Injury,Institute of Burns,Southwest Hospital,Third Military Medical University,Chongqing Key Laboratory for Proteomics of Diseases,Chongqing 400038,China)
Abstract:Objective To screen the proteins interacting with FOXP3 in yeast two-hybrid system. Methods The bait plasmid pGBKT7 (named as pGBKT7-FOXP3) was constructed successfully. Using FOXP3 as bait, a human liver cDNA library was screened and the proteins interacting with FOXP3 were searched. The false positive clones were discarded by one to one yeast two-hybrid system, and the positive clones were sequenced and analyzed by bioinformatic methods. Results The bait plasmid pGBKT7-FOXP3 was constructed successfully a...
Keywords:FOXP3
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