| 胃癌耐药细胞株SGC-7901/5-FU的建立及其耐药机制的初步探讨 |
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| 引用本文： | 黎伯培,陈俊强,刘金禄,王震,毛远天,陈业阳,裴明毓,徐瑜杰.胃癌耐药细胞株SGC-7901/5-FU的建立及其耐药机制的初步探讨[J].消化肿瘤杂志（电子版）,2012,4(3):163-169. |
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| 作者姓名： | 黎伯培 陈俊强 刘金禄 王震 毛远天 陈业阳 裴明毓 徐瑜杰 |
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| 作者单位： | 广西医科大学第一附属医院胃肠外科,南宁,530021 |
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| 基金项目： | 广西自然科学基金重点项目(项目编号：编号2012GXNSFDA239001)广西医疗卫生重点科研课题基金资助项目(项目编号：编号重2012067)广西教育厅科研基金资助项目(项目编号：编号桂教201012MS062)广西自然科学基金资助项目(项目编号：编号桂科自0832113) |
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| 摘 要： | 目的构建耐5-FU的胃癌耐药细胞株,初步探讨细胞发生5-FU耐药的可能机制.方法 通过药物耐药间歇冲击并浓度梯度递增法诱导建立胃癌耐药细胞株SGC-7901/5-FU.应用MTT法检测亲代细胞对4种化疗药物的IC50并计算耐药指数(RI).通过MTT法绘制细胞的生长曲线计算细胞倍增时间.流式细胞仪分析细胞周期分布.RT-PCR检测抑癌基因P53、癌基因Bcl-2、促凋亡基因半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(caspase-3)、死亡相关蛋白激酶(death associated protein kinase,DAPK)家族成员(DAPK-1、DAPK-2、DAPK-3)、多药耐药蛋白(multidrug resistance proteins,MRP)亚家族中的MRP-6、多药耐药基因1(multidrug resistance 1,MDR1)、切除交叉互补修复基因(excision repair cross-complementing 1,ERCC-1)的表达.Western Blot检测MDR1 编码的P糖蛋白(P-gp)的表达水平.结果SGC-7901/5-FU对5-FU、顺铂、环磷酰胺的耐药指数分别为6.26、3.71、5.25.SGC-7901与SGC-7901/5-FU细胞倍增时间分别为(30.82±1.46)h和(46.01±4.15)h,SGC-7901/5-FU细胞增殖速率显著变缓(P＜0.05).与亲代细胞比较,耐药子株S期细胞显著减少,G0/G1期细胞则显著增高(P＜0.01),而G2/M期细胞无显著差异(P＞0.05).耐药子株SGC-7901/5-FU细胞MDR-1、MRP-6、DAPK-3和P-gp表达显著上调(P＜0.01),而ERCC-1、caspase-3、P53、DAPK-1、DAPK-2、Bcl-2的表达均无显著变化(P＞0.05). 结论成功构建胃癌耐5-FU细胞株SGC-7901/5-FU,其对顺铂、环磷酰胺具有交叉耐药,耐药机制与细胞周期S期细胞比例减少、G0/G1期细胞比例升高有关,可能与MDR-1、MRP-6、DAPK-3基因及P-gp蛋白表达上调有关.
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| 关 键 词： | 多药耐药 氟尿嘧啶 胃癌 凋亡 |
Establishment of 5-FU resistant gastric cell line and preliminary study on its multi-drug resistance mechanisms |
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