| 丹参功能基因组学研究Ⅰ——cDNA芯片的构建 |
| |
| 引用本文： | 崔光红,黄璐琦,唐晓晶,邱德有,王学勇,付桂芳.丹参功能基因组学研究Ⅰ——cDNA芯片的构建[J].中国中药杂志,2007,32(12):1137-1141. |
| |
| 作者姓名： | 崔光红 黄璐琦 唐晓晶 邱德有 王学勇 付桂芳 |
| |
| 作者单位： | 1. 中国中医科学院,中药研究所,北京,100700
2. 中国林业科学院,林业研究所,北京,100091 |
| |
| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划(973计划);国家高技术研究发展计划(863计划) |
| |
| 摘 要： | 目的：构建丹参cDNA芯片,为基因表达谱研究提供条件。方法：采用CTAB法提取丹参根总RNA,采用Pharmacia公司QuichprepTM Micro mRNA PurifiCation Kit分离mRNA后,通过在 cDNA 分子两端加上 EcoRⅠ/NotⅠ接头,在 T4 多核苷酸激酶的作用下磷酸化,与表达载体λZAP Express Predigested Vector 连接,然后用包装蛋白在体外包装连接产物,感染E.coli XL1-Blue MRF’构建成cDNA 文库。挑取分离良好的噬菌斑进行PCR扩增,经过电泳检测、纯化、再次电泳检测后得到的克隆用于芯片点制。以丹参actin基因作为阳性对照,不含DNA的点样液和PolyA为阴性对照。结果：cDNA 文库插入片段长度为500~2 500 bp。共得到4 354个克隆用于芯片点制。单色荧光（Cy3）杂交显示,阳性对照均出现杂交信号,阴性点没有杂交信号。整张芯片背景清晰,漏点少,杂交点为完整的圆形,芯片质量完好。结论：该芯片的制作为首张有关道地药材的cDNA芯片,为丹参功能基因组的研究提供了强有力的工具。
|
| 关 键 词： | 丹参 cDNA芯片 |
| 文章编号： | 1001-5302(2006)12-1137-05 |
| 收稿时间： | 2006/11/14 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2006年11月14 |
Functional genomics studies of Salvia miltiorrhiza Ⅰ Establish cDNA microarray of S. miltiorrhiza |
| |
| CUI Guang-hong; HUANG Lu-qi;TANG Xiao-jing; QIU De-you; WANG Xue-yong; FU Gui-fang.Functional genomics studies of Salvia miltiorrhiza Ⅰ Establish cDNA microarray of S. miltiorrhiza[J].China Journal of Chinese Materia Medica,2007,32(12):1137-1141. |
| |
| Authors: | CUI Guang-hong; HUANG Lu-qi;TANG Xiao-jing; QIU De-you; WANG Xue-yong; FU Gui-fang |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Salvia miltiorrhiza cDNA microarray |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
