| 上海2株严重急性呼吸综合征冠状病毒2的分离与鉴定 |
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| 引用本文： | 彭浩然,李成忠,唐海琳,薛建亚,陈志辉,梁雪松,朱咏梅,夏炳辉,朱勇喆,吴俊杰,赵兰娟,任浩,江亮亮,何燕华,戚中田,赵平.上海2株严重急性呼吸综合征冠状病毒2的分离与鉴定[J].第二军医大学学报,2020,41(4):365-370. |
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| 作者姓名： | 彭浩然 李成忠 唐海琳 薛建亚 陈志辉 梁雪松 朱咏梅 夏炳辉 朱勇喆 吴俊杰 赵兰娟 任浩 江亮亮 何燕华 戚中田 赵平 |
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| 作者单位： | 1. 海军军医大学(第二军医大学)海军医学系生物医学防护教研室, 上海 200433;2. 海军军医大学(第二军医大学)长海医院感染科, 上海 200433;3. 海军军医大学(第二军医大学)长海医院呼吸与危重症医学科, 上海 200433*通信作者 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划（2016YFC1200401），国家科技重大专项（2017ZX10304403-003）. |
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| 摘 要： | 目的 从新型冠状病毒肺炎（COVID-19）患者鼻/咽拭子样本中分离、培养严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-CoV-2）。方法 将来自上海市COVID-19患者的3份鼻/咽拭子样本以TPCK胰酶处理，然后接种Vero E6细胞；待大部分细胞出现明显病变时，取细胞培养上清用qRT-PCR法检测病毒核酸，并用反转录PCR扩增病毒受体结合区（RBD）基因片段；将病毒扩增培养后感染接种于96孔板中的Vero E6细胞，观察细胞病变效应，并用免疫荧光法检测病毒蛋白。结果 2份COVID-19患者鼻/咽拭子样本接种的Vero E6细胞出现明显细胞病变效应，细胞培养上清中检测出新复制产生的SARS-CoV-2核酸，扩增出的RBD序列与早期分离出的SARS-CoV-2相应序列完全一致；病毒感染的Vero E6细胞病变迅速，并能与SARS-CoV-2核衣壳蛋白（N蛋白）单克隆抗体、刺突蛋白（S蛋白）单克隆抗体及COVID-19患者恢复期血清发生反应。结论 从2份COVID-19患者鼻/咽拭子样本中成功分离出SARS-CoV-2，为后续开展SARS-CoV-2感染与致病机制研究、防治药物与疫苗的研发奠定了基础。
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| 关 键 词： | 严重急性呼吸综合征冠状病毒2 新型冠状病毒肺炎 鼻拭子 咽拭子 病毒分离 |
| 收稿时间： | 2020/3/28 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2020/4/8 0:00:00 |
Isolation and identification of two strains of severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 from coronavirus disease 2019 patients in Shanghai |
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| PENG Hao-ran,LI Cheng-zhong,TANG Hai-lin,XUE Jian-y,CHEN Zhi-hui,LIANG Xue-song,ZHU Yong-mei,XIA Bing-hui,ZHU Yong-zhe,WU Jun-jie,ZHAO Lan-juan,REN Hao,JIANG Liang-liang,HE Yan-hu,QI Zhong-tian,ZHAO Ping.Isolation and identification of two strains of severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 from coronavirus disease 2019 patients in Shanghai[J].Academic Journal of Second Military Medical University,2020,41(4):365-370. |
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| Authors: | PENG Hao-ran LI Cheng-zhong TANG Hai-lin XUE Jian-y CHEN Zhi-hui LIANG Xue-song ZHU Yong-mei XIA Bing-hui ZHU Yong-zhe WU Jun-jie ZHAO Lan-juan REN Hao JIANG Liang-liang HE Yan-hu QI Zhong-tian ZHAO Ping |
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| Institution: | 1. Department of Biomedical Defense, Faculty of Naval Medicine, Naval Medical University (Second Military Medical University), Shanghai 200433, China;2. Department of Infectious Diseases, Changhai Hospital, Naval Medical University (Second Military Medical University), Shanghai 200433, China;3. Department of Respiratory and Critical Care Medicine, Changhai Hospital, Naval Medical University (Second Military Medical University), Shanghai 200433, China*Corresponding authors |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 coronavirus disease 2019 nasal swab sample throat swab sample virus isolation |
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