131I标记CD133单链抗体对人肝癌CD133+HepG2干细胞的抑制作用

目的：研究131I标记CD133单链抗体(single chain rariable fragment, ScFv)在体外对人肝癌CD133+ HepG2干细胞的抑制作用。方法：免疫磁珠分选HepG2细胞，流式细胞术检测分选前后HepG2细胞的CD133表达率，克隆形成实验及体内成瘤实验验证CD133+ HepG2细胞的“干性”。氯胺T法131I标记CD133 ScFv并测定标记率、比活度、放射性浓度。将分选出的CD133+ HepG2细胞分为131I-CD133抗体治疗组、131I治疗组、CD133抗体治疗组和131I+CD133抗体治疗组，MTT法检测各组中对CD133+ HepG2细胞生长抑制的最适剂量和不同药物在12、48、72 h三个时间点对CD133+HepG2干细胞的生长抑制作用，流式细胞术检测各组细胞周期的变化。结果：分选的HepG2细胞的CD133表达率显著高于未分选细胞\（97.71±113）% vs（1.52±0.78）%，t=1.13、P=0.000\]。CD133+ HepG2细胞相对于CD133- HepG2细胞具有更强的体外成球、克隆形成能力\（4503±1.35）% vs (74±0.54)% ；t=3.92，P=0.000\]和体内成瘤能力。131I-CD133 ScFv的标记率为88.92%，放射化学纯度为98.63%。当131I为3.7 MBq/100 μl、CD133抗体为1 μg/100 μl时，对CD133+ HepG2细胞的抑制率最高，达（89.58±074）%；在此剂量下131I-CD133 ScFv治疗组对CD133+ HepG2细胞生长抑制率显著高于其余各实验组，且呈时间依赖性。 131I-CD133 ScFv治疗组G0/G1期细胞比例为（27.50±1.12）%，较其余各组均明显减少（P<0.05）。结论：成功制备的131I-CD133 ScFv在体外能有效抑制人肝癌CD133+ HepG2干细胞的生长。