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| 抗克伦特罗单克隆抗体杂交瘤的建立及其分泌单抗的免疫学特性鉴定 | |
| 引用本文： | 王选年,周继勇,杨艳艳,邢广旭,李青梅,杨继飞,柴书军,赵东,康晓笛,张改平. 抗克伦特罗单克隆抗体杂交瘤的建立及其分泌单抗的免疫学特性鉴定[J]. 中国免疫学杂志, 2004, 20(3): 194-198 |
| 作者姓名： | 王选年 周继勇 杨艳艳 邢广旭 李青梅 杨继飞 柴书军 赵东 康晓笛 张改平 |
| 作者单位： | 1. 河南职业技术师范学院动物科学系,新乡,453003 2. 浙江大学动物科学学院,杭州,310029 3. 河南省农业科学院生物技术研究所,郑州,450002 4. 河南百奥生物工程有限公司,郑州,450002 |
| 基金项目： | 河南省科技攻关重大项目资助 (2 0 0 1招标 ) |
| 摘 要： | 目的 :建立抗克伦特罗 (CL)单克隆抗体杂交瘤细胞系 ,制备CL单克隆抗体 ,并鉴定其免疫学特性。方法 :用重氮化法将半抗原CL偶联于载体蛋白BSA ,形成结合抗原BSA CL ;以BSA CL免疫BALB/C小鼠 ,应用杂交瘤技术建立分泌CL单克隆抗体细胞株 ;用体内诱生腹水法生产CL单抗 ,硫酸钠盐析法提纯。应用抗小鼠同种型抗体测定单抗的同种型 ,用竞争性ELISA和胶体金膜层析试验测定CL单抗的反应特异性和反应动力学。结果 :筛选出C 4G1、C 2H6、C 2D6和C 4C94株高敏感性和高特异性杂交瘤生产单抗 ,其单抗的间接ELISA效价分别为 5× 10 -5、3× 10 -4、6× 10 -4、2× 10 -5;同种型分别为IgG1/κ、IgG1/κ、IgG2a/κ、IgG2a/λ。C 4G1的亲和力常数K =1 6 8× 10 8L/mol,C 2H6的亲和力常数K =1 3× 10 8L/mol。经WestGold蛋白质印迹鉴定单抗与CL特异性结合。C 4G1单抗对CL的半数抑制浓度 (IC50 )为 7 94ng/ml,对沙丁胺醇 (Sb)的IC50 为 10 0 0ng/ml,对肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素和来克多巴胺的IC50 均≥ 6 4 0 0ng/ml;C 4G1单抗与Sb的交叉反应性为0 79% ,与异丙肾上腺素的交叉反应性为 0 12 % ,而与肾上腺素、去甲肾上腺素、来克多巴胺、各类抗生素及多种维生素均无交叉反应性。结论 :用单克隆抗体杂交瘤技术 |
| 关 键 词： | β-肾上腺素激动剂 克伦特罗 单克隆抗体 免疫学特性 |
| 文章编号： | 1000-484X(2004)03-0194-05 |
Generation and characterisation of monoclonal antibody for the β-Adrenergic agonist clenbuterol |
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| Abstract: | |
| Keywords: | Adrenergic agonist Clenbuterol Monoclonal antibody Immunity characterisation |
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