丹参酮ⅡA 磺酸钠对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的影响

目的：观察丹参酮ⅡA 磺酸钠（tanshinone ⅡA sodium sulfonate，TSS）对雄性（SD）大鼠心肌缺血-再灌注损伤（ischemia／reperfusion，I ／R）的影响，并初步探讨其作用机制。方法结扎大鼠冠状动脉左前降支30 min，结扎的心肌组织颜色变灰标志着结扎成功，再灌注24 h 建立缺血-再灌注模型，将存活的 SD 大鼠随机（随机数字法）分为对照组（Sham 组，n ＝10）、缺血-再灌注组（I ／R 组，n ＝10）、TSS 低剂量组（TSS-L 组，n ＝10）、TSS 中剂量组（TSS-M组，n ＝9）、TSS 高剂量组（TSS-H 组，n ＝9）。MAP 心脏功能分析系统检测血流动力学指标，TTC 染色法检测大鼠心肌梗死面积，Western blot 法检测心肌 Bcl-2、Bax、Caspase-3、Lc3B／Lc3A、Beclin-1及高迁移率蛋白 B1（high-mobility group box1，HMGB1）的表达。多组间比较采用 ANOVA 分析，多组间两两比较采用 LSD-t 检验，以 P ＜0.05为差异有统计学意义。结果 I ／R 组较 Sham 组心功能舒缩参数明显降低，TSS 预处理使其显著升高（P ＜0.05），但 DAP、Pmin 差异无统计学意义（P ＞0.05）。TSS 预处理组心肌梗死百分比显著低于 I ／R 组（P ＜0.05）。与 Sham 组相比，I ／R 组显著增加了 Caspase-3表达（P ＜0.01）；TSS 预处理组能够明显下调 Caspase-3蛋白表达（P ＜0.01）。I ／R组 Bax 表达亦明显升高（P ＜0.01），TSS 能够抑制 Bax 蛋白表达（P ＜0.01）。I ／R 组降低了 Bcl-2蛋白的表达水平（P ＜0.05），不同剂量的 TSS 预处理均使 Bcl-2表达水平升高（P ＜0.01）。I ／R 组Bcl-2／Bax 较 Sham 组比值降低（P ＜0.05）；TSS 预处理使其明显升高（P ＜0.05）。自噬相关蛋白Beclin-1与 Lc3B／Lc3A 有相似的变化趋势，I ／R 组 Beclin-1蛋白及 Lc3B／Lc3A 水平低于 Sham 组（P＜0.05），TSS 预处理能够上调 Beclin-1表达与 Lc3B／Lc3A 比值（P ＜0.05）。与 Sham 组比较HMGB1表达明显增高（P ＜0.05），TSS 预处理组较 I ／R 组减少了 HMGB1的表达（P ＜0.01）。结论丹参酮ⅡA 磺酸钠对 SD 大鼠心肌缺血-再灌注损伤具有保护作用，其机制与抑制细胞凋亡，激活细胞自噬有关。