| SD乳鼠骨髓间充质干细胞体外改良筛选法培养及鉴定 |
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| 引用本文： | 李楠,翁军权,谢华德,孙海鹏.SD乳鼠骨髓间充质干细胞体外改良筛选法培养及鉴定[J].标记免疫分析与临床,2019,26(5):851-857. |
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| 作者姓名： | 李楠 翁军权 谢华德 孙海鹏 |
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| 作者单位： | 深圳市人民医院(暨南大学第二临床医院南方科技大学第一附属医院)口腔科,广东深圳,518020;深圳市人民医院(暨南大学第二临床医院南方科技大学第一附属医院)口腔科,广东深圳,518020;深圳市人民医院(暨南大学第二临床医院南方科技大学第一附属医院)口腔科,广东深圳,518020;深圳市人民医院(暨南大学第二临床医院南方科技大学第一附属医院)口腔科,广东深圳,518020 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金项目;深圳市科技创新基础研究自由探索项目 |
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| 摘 要： | 目的评估应用SD乳鼠骨髓的改良筛选法分离培养骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSCs)的可行性及优势,探讨一种简单高效的BMSCs体外分离、纯化及扩增的方法。方法选择7d龄SD大鼠6只,无菌解剖大鼠双侧股骨,于完全培养基浸泡、剪碎,反复吹打暴露骨髓腔,高速震荡3min后取上清液接种于培养瓶中,24h后半量换液,48h后全量换液,以后隔天换液。应用CCK-8法测定生长曲线;成骨分化诱导3周后进行茜素红染色,成脂分化诱导4周后进行油红“O”染色;应用流式细胞仪鉴定细胞表面抗原。结果原代培养的BMSCs细胞生长曲线呈“S”形,接种1d后有少量细胞贴壁,第3~6天为对数增殖期,第7天进入平台期。BMSCs经成骨诱导3周后茜素红染色细胞外基质中可见深红色团块状矿化结节;经成脂肪诱导4周后胞浆内充满“串珠状”红色脂滴。流式细胞仪检测BMSCs表面抗原CD29、CD44、CD90阳性,CD34和CD45阴性。结论应用7d龄SD乳鼠的改良全骨髓自然贴壁筛选法可以高效分离纯化出BMSCs。
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| 关 键 词： | 骨髓间充质干细胞 细胞分离 细胞培养 SD乳鼠 诱导分化 |
The Culturing Method and Identification of Neonatal SD Rat Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells in vitro |
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| LI Nan,WENG Jun-quan,XIE Hua-de,SUN Hai-peng.The Culturing Method and Identification of Neonatal SD Rat Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells in vitro[J].Labeled Immunoassays and Clinical Medicine,2019,26(5):851-857. |
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| Authors: | LI Nan WENG Jun-quan XIE Hua-de SUN Hai-peng |
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| Institution: | (Shenzhen people’s Hospital(The 2^nd Clinical Medical College of Jinan University/1^st Affiliated Hospital of Southern University of Science and Technology),Shenzhen 518020,China) |
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| Abstract: | LI Nan;WENG Jun-quan;XIE Hua-de;SUN Hai-peng(Shenzhen people’s Hospital(The 2^nd Clinical Medical College of Jinan University/1^st Affiliated Hospital of Southern University of Science and Technology),Shenzhen 518020,China) |
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| Keywords: | BMSCs Cell isolation Cell culture SD neonatal rats Differentiation |
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