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磷酸胆碱聚合物载AT1受体siRNA对血管内皮细胞AT1受体表达的影响
引用本文:王霞,冯辉,林雪烽,徐建荣,孙敏,程莹,王志荣,张卓琦.磷酸胆碱聚合物载AT1受体siRNA对血管内皮细胞AT1受体表达的影响[J].齐齐哈尔医学院学报,2013,34(15):2185-2188.
作者姓名:王霞  冯辉  林雪烽  徐建荣  孙敏  程莹  王志荣  张卓琦
作者单位:徐州医学院附属医院心内科,江苏,221002
基金项目:本课题受国家自然科学基金,江苏省高校自然科学基金,徐州医学院院长专项人才基金
摘    要:目的探讨新型阳离子磷酸胆碱聚合物MPC30-DEA70载AT1受体siRNA对血管内皮细胞AT1受体表达的影响。方法应用琼脂糖凝胶电泳表征具有不同N/P比值的MPC30-DEA70与siRNA的复合物;将不同比例的MPC30-DEA70/siRNA基因复合物转染至人脐静脉内皮细胞,应用荧光显微镜(FM)检测其细胞内分布;流式细胞术(FCM)检测转染效率及荧光强度;Western blot法和RT-PCR法检测AT1受体蛋白及mRNA的表达情况。结果不同N/P比值的基因复合物在电泳中可见不同程度的迟滞现象,随正电性增强而显著。FM观察到MPC30-DEA70/siRNA复合物分布在细胞核周围,FCM结果显示随N/P比值的增大,转染效率明显增加,荧光强度也随之增强。RT-PCR法和Western blot法显示随着N/P比值的增大,基因复合物可使AT1受体的mRNA和蛋白表达明显下降(P<0.05)。结论 MPC30-DEA70可作为AT1受体siRNA的载体转染至血管内皮细胞,下调AT1受体的mRNA及蛋白的表达,提示阳离子磷酸胆碱聚合物可以有效负载和运输siRNA,抑制特异基因的表达,是一种有效的非病毒类转基因载体。

关 键 词:磷酸胆碱聚合物  siRNA  AT1受体  非病毒转基因载体

Effect of phosphorylcholine polymer MPC30-DEA70 carried siRNA on AT1 receptor expression in vascular endothelial cells
Institution:WANG Xia. Department of Cardiology in Hospital Affiliated to Xuzhou Medical college,Xuzhou,221002,China
Abstract:
Keywords:
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