基于HPLC-Q-TOF-MS/MS技术咳喘宁颗粒化学成分分析及多指标定量测定

目的 采用高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱技术（HPLC-Q-TOF-MS/MS）对咳喘宁颗粒化学成分进行分析，并建立 HPLC 多成分含量测定方法。方法 采用 HPLC-Q-TOF-MS/MS 技术，色谱柱 Agilent ZORBAX C₁₈（150 mm×4.6 mm，5 μm），柱温 35 ℃，体积流量 1.0 mL·min^-1，进样量 10 μL，流动相 A：0.1% 甲酸，流动相 B：乙腈，梯度洗脱；电喷雾离子源（ESI），正、负离子模式扫描，结合对照品和文献数据鉴定咳喘宁颗粒中的化学成分，并建立HPLC法同时测定新绿原酸、绿原酸、3，5-O-二咖啡酰基奎宁酸、异绿原酸B、4，5-O-二咖啡酰基奎宁酸、柚皮苷的含量。色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（Waters AtlantisTM T3色谱柱，250 mm×4.6 mm，5 μm），以甲醇-0.1%甲酸为流动相，梯度洗脱：0～20 min，3%～15% 甲醇；20～25 min，15%～18% 甲醇；25～26 min，18%～23% 甲醇；26～45 min，23%甲醇；45～46 min，23%～38% 甲醇；46～60 min，38% 甲醇；60～61 min，38%～42% 甲醇；61～70 min，42% 甲醇 ；70～80 min，42%～90%甲醇；体积流量1.0 mL·min^-1，柱温30 ℃；进样量10 μL，检测波长324、283 nm。结果 共鉴定咳喘宁颗粒中86个化合物，20个来自生麻黄、15个来自白屈菜、30个来自金银花、22个来自枇杷叶、12个来自金沸草、14个来自化橘红，其中有26个化合物经与对照品比对确认，选择新绿原酸、绿原酸、3，5-O-二咖啡酰基奎宁酸、异绿原酸B、4，5-O-二咖啡酰基奎宁酸和柚皮苷作为含量测定的质控指标，6种成分在各自质量浓度范围内线性关系良好（r≥0.999 9），精密度、稳定性及重复性良好，加样回收率为99.48%～103.39%，RSD为1.29%～1.98%。对3批咳喘宁颗粒进行多成分含量测定，方法可行。结论 在质谱成分解析的基础上，建立咳喘宁颗粒6种化学成分的含量测定方法，为咳喘宁颗粒的药效物质基础和质量标准研究提供参考。

Chemical composition analysis and multi-index content determination of Kechuanning Granules based on HPLC-Q-TOF-MS/MS technology