Zur Polypeptidketten-Struktur von Immunglobulinen

Zusammenfassung Individuelle normale IgG wurden isoelektrisch in eine Vielzahl von Komponenten getrennt, deren IP zwischen pH 5,5 und 9,5 lagen. Im Gegensatz dazu focussierten individuelle Myelom IgG einheitlich. Die isoelektrischen Punkte dieser Paraproteine unterschieden sich untereinander stark, verteilten sich alle zusammen jedoch ebenfalls über den pH-Bereich 5–9. Dieser Befund entspricht der Auffassung, daß diese Paraproteine normale Immunglobuline repräsentieren.Ähnliche Ergebnisse hatte die Fraktionierung der L- und H-Polypeptidketten. Während normale L- und H-Ketten eine ausgeprägte Heterogenität aufwiesen, waren die IgG-L- und H-Ketten von Myelomproteinen einheitlich. Mittels gleichzeitiger Anwendung der PAA-Elektrophorese, quantitativen Aminosäurenanalyse, Endgruppenbestimmung und anderer protein-chemischer Methoden konnte gezeigt werden, daß im Falle der L-Ketten sowohl die Aminosäureverteilung als auch die Konfiguration das unterschiedliche isoelektrische Verhalten bedingt. Die Anwendung der isoelektrischen Analyse für den Nachweis von Rekombinatbildungen aus L- und H-Ketten wurde gezeigt.

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Summary Myeloma IgG and its light and heavy polypeptide chains were subjected to isoelectric focusing in a vertical column containing a combined pH and density gradient. The results have been compared to those obtained by isoelectric separation of normal individual IgG and its polypeptide chains. In carrier ampholytes of two pH steps each individual myeloma globulin was focused in only one fraction, but the isoelectric points of all myeloma globulins were distributed between pH 5 and pH 9. In contrast to these results each normal individual IgG was electrofocused in a multiplicity of isoelectric fractions exhibiting the same pH range from pH 5 to pH 9. Similar results were obtained by the analysis of light and heavy polypeptide chains. A remarkable degree of heterogeneity could be demonstrated in normal and a homogenous isoelectric pattern in myeloma IgG polypepide chains. By polyacrylamide-gel-electrophoresis it could be demonstrated that a direct proportionality of isoelectric point and electrophoretic mobility in polyacrylamide-gel did'nt exist. By the quantitative aminoacid determination, endgroup analysis and other physico-chemical methods it could be shown, that differences in the isoelectric point of L-chains are not exclusively caused by differences in the amino acid composition. The use of isoelectric focusing for the analysis of L- and H-chains recombination has been demonstrated.

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Wir danken der Deutschen Forschungsgemeinschaft für ihre Unterstützung.