| 人肿瘤抑素相关T21RGD肽的表达与纯化 |
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| 引用本文： | 马洪星,栗亚,张宇雯,李冀宏,刘岩,刘远莉,李丹,刘兴汉.人肿瘤抑素相关T21RGD肽的表达与纯化[J].国际遗传学杂志,2007,30(3):169-172. |
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| 作者姓名： | 马洪星 栗亚 张宇雯 李冀宏 刘岩 刘远莉 李丹 刘兴汉 |
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| 作者单位： | 1. 150081,哈尔滨,黑龙江省部共建国家重点实验室培育基地-黑龙江省生物医药工程重点实验室,哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室;163001,大庆油田总医院检验科
2. 150081,哈尔滨,黑龙江省部共建国家重点实验室培育基地-黑龙江省生物医药工程重点实验室,哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室 |
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| 摘 要： | 目的 构建引入RGD序列人肿瘤抑素相关21肽（T21RGD）―内含肽―几丁质结合蛋白融合表达载体，实现目的肽的几丁质珠亲和层析一步纯化。方法 人工设计合成T21RGD肽基因， 经重组定向克隆插入到原核表达载体pTYB2，酶切和测序鉴定正确后转化入大肠杆菌BL21（DE3），IPTG诱导其融合表达，对表达蛋白进行几丁质珠亲和层析，DTT诱导柱上裂解以获得T21RGD肽。经Trcine-SDS-PAGE和反相高效液相色谱(RP-HPLC)对纯化产物进行鉴定。结果 质粒酶切和测序结果显示，含T21RGD肽基因按正确方向和序列插入质粒,融合蛋白表达量达菌体蛋白总量的50％以上，Trcine-SDS-PAGE显示了T21RGD肽目的条带与预期相符，反相高效液相色谱测定峰纯度达97％。结论 成功构建T21RGD肽融合表达载体，实现了融合蛋白在大肠杆菌中高效表达和T21RGD肽几丁质珠亲和层析一步纯化，为进一步研究T21RGD肽抗肿瘤活性和作用机理奠定基础。
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| 关 键 词： | 肿瘤抑素 RGD序列 基因重组 纯化 |
| 收稿时间： | 2006-12-12 |
| 修稿时间： | 2006-12-12 |
Expression and Purification of Recombinant Human Tumstatin Relevant T21RGD Peptide |
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| MA Hong-xing,LI Ya,ZHANG Yu-wen,LI Ji-hong,LIU Yan,LIU Yuan-li,LI Dan,LIU Xing-han.Expression and Purification of Recombinant Human Tumstatin Relevant T21RGD Peptide[J].International JOurnal of Genetics,2007,30(3):169-172. |
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| Authors: | MA Hong-xing LI Ya ZHANG Yu-wen LI Ji-hong LIU Yan LIU Yuan-li LI Dan LIU Xing-han |
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| Institution: | 1 Biopharmaceutical Key Laboratory of HeilongJiang Province-Incubator of State Key Laboratory, Department of Biochemistry and Molecular Biology, Harbin Medical University, Harbin 150081 ; 2The Clinical laboratory of Daqing Qilfields General Hospital,Daqing 163001, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Tumstatin RGD sequence Recombinant Purification |
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