小鼠角膜移植排斥反应中植片内细胞因子表达水平的变化

背景研究表明细胞因子在角膜移植免疫调节中起重要的作用，但关于角膜移植术后角膜植片内细胞因子表达的变化报道较少。目的探讨角膜移植术后不同时间点细胞因子的表达变化。方法采用雌性6～8周龄BALB／c小鼠及C57BL／6小鼠分别建立小鼠自体角膜移植和同种异体角膜移植模型，每组各10只，自体角膜移植术组供体和受体同为BALB／c小鼠，同种异体角膜移植术组供体为C57BL／6小鼠，受体为BALB／c小鼠。于术后1d开始临床观察角膜植片并对炎症程度进行评分，当植片评分总和≥5分或植片混浊≥2分时为发生植片排斥反应。将BALB／c小鼠随机分为正常对照组3只和同种异体角膜移植术组15只，后者分别于术后6h及1、3、7、14d对角膜植片行逆转录PCR（RT—PCR）检测植片中细胞因子白细胞介素4（IL-4）、γ-干扰素（IFN-γ）、IL-10、肿瘤坏死因子α（TNF—α）表达的变化。结果在60d的观察期中，自体角膜移植术后小鼠角膜植片混浊评分均〈2分，植片的炎症评分之和均〈5分，植片存活率为100％，但同种异体角膜移植术后角膜植片水肿、混浊，伴有角膜新生血管形成，至术后24d角膜植片排斥反应评分之和均≥5分，植片混浊评分≥2分，全部发生排斥反应，角膜植片平均存活时间为（17．80±4．66）d。RT—PCR检测结果表明，正常角膜中IL-4和IFN-γ呈阳性表达，IL-10和TNF-α表达阴性。同种异体角膜移植术后6h可检测到IL-4呈阳性表达，IFN-γ和IL-10表达呈强阳性，而未检测到TNF—α的表达。术后1～3d角膜植片中IL-4呈强阳性表达，IFN-γ阳性表达，TNF—α表达增强，IL-10表达逐渐消失。角膜移植术后7d，可见IL-4表达阴性，而IFN-γ、IL-10和TNF—α仍呈强阳性表达。至术后14d，角膜植片中IL-4、IFN-γ和TNF—α．均未见表达，仅检测到IL-10呈阳性表达。结论TNF-α是角膜移植术后局部参与调控的主要因子。

Expression of cytokine in mouse graft of corneal allograft rejection