MAPK1基因沉默对肺癌A549细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响

目的 探讨丝裂原活化蛋白激酶1(mitogen-activated protein kinases1,MAPK1)基因沉默对肺癌A549细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭能力的影响。方法 利用CRISPR/CAS9基因编辑技术构建MAPK1沉默细胞系，采用Real-time PCR和Western blot检测沉默MAPK1后mRNA和蛋白表达水平。将MAPK1沉默载体与空载体转染至肺癌A549细胞中，并分为MAPK1沉默组、空载体组和空白组。对各组的肺癌A549细胞进行培养，利用CCK-8实验检测细胞增殖能力；平板集落形成实验检测细胞集落形成能力；平板划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力；流式细胞术检测细胞凋亡和周期情况以及Western blot实验检测MAPK1沉默后ERK/mTOR通路蛋白表达。结果 Real-time PCR和Western blot结果表明成功构建肺癌A549细胞MAPK1沉默细胞系。MAPK1沉默使肺癌A549细胞增殖能力减弱（P<0.05），迁移和侵袭能力降低（P<0.05），细胞凋亡率增加且细胞周期被阻滞于S期（P<0.0...