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| 钙敏感受体缺失对小鼠成骨细胞增殖与分化的影响及机制研究 | |
| 引用本文： | 张崛,冯玉旭,徐勇,刘欢,苗登顺,任永信,范卫民.钙敏感受体缺失对小鼠成骨细胞增殖与分化的影响及机制研究[J].中华创伤骨科杂志,2013,15(5):430-434. |
| 作者姓名： | 张崛 冯玉旭 徐勇 刘欢 苗登顺 任永信 范卫民 |
| 作者单位： | 1. 210029,南京医科大学第一附属医院骨科 2. 南京市浦口区中心医院骨科 3. 南京医科大学骨与干细胞研究中心 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(项目编号：30901528),National,Natural,Science,Foundation,of,China(项目编号：30901528), |
| 摘 要： | 目的 探讨钙敏感受体(CaSR)在小鼠成骨细胞增殖与分化中的作用,以及Wnt信号通路在其促进成骨细胞增殖及分化过程中的调节作用. 方法 取新生同窝野生型小鼠(对照组)和CaSR敲除纯合子小鼠(实验组)各4只,分离培养颅骨成骨细胞并传至第3代,分别于培养2、4、6、8d时采用CCK-8法测定细胞的吸光度(OD)值,检测成骨细胞碱性磷酸酶(ALP)的活性.取培养6d的细胞行实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测核心结合因子(Runx2)、ALP、骨钙素(OCN)、核激活因子受体配体(RANKL)、骨保护素(OPG)及β-链蛋白的mRNA基因表达水平；采用Western Blot检测β-链蛋白、Wnt-5a、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、Runx2的蛋白表达水平. 结果 培养6d时对照组和实验组成骨细胞的OD值(1.55±0.05、1.26±0.02)和ALP活性(0.023±0.002)、(0.017±0.001)U/mg· prot]均达到峰值,与其他时间点比较差异均有统计学意义(P＜0.05)；同一时间点实验组成骨细胞的OD值和ALP活性均低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组比较,培养6d时实验组成骨细胞的Runx2、ALP、OCN、RANKL/OPG、β-链蛋白的mRNA表达水平,以及β-链蛋白、Wnt-5a、IGF-1、Runx2的蛋白表达水平均显著降低,两组比较差异均有统计学意义(P＜0.05). 结论 CaSR缺失将导致成骨细胞的增殖和分化障碍,其机制可能与经典的Wnt信号通路抑制有关. |
| 关 键 词： | 成骨细胞 受体 G-蛋白偶联 细胞增殖 细胞分化 信号传导 |
Effect of lacking calcium-sensing receptor on proliferation and differentiation of mouse osteoblasts and its mechanism |
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| Abstract: | |
| Keywords: | Osteoblasts Receptors G-protein coupled Cell proliferation Cell differentiation Signal transduction |
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